[发明专利]HIV突变型表面糖蛋白及其纳米化抗原与制备方法有效
申请号: | 201910406942.2 | 申请日: | 2019-05-15 |
公开(公告)号: | CN110184298B | 公开(公告)日: | 2023-05-16 |
发明(设计)人: | 彭贵青;王健斌;龚贻洲;周军;许俊峰;李强 | 申请(专利权)人: | 武汉璟泓科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/866 | 分类号: | C12N15/866;C07K14/155;C07K1/16;C12N15/49;G01N33/531;C12R1/93 |
代理公司: | 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 | 代理人: | 黄君军 |
地址: | 430074 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | hiv 突变型 表面 糖蛋白 及其 纳米 抗原 制备 方法 | ||
1.一种表达HIV突变型表面糖蛋白的杆状病毒,其特征在于,该杆状病毒的表达区位置插入了HIV突变型表面糖蛋白编码序列,所述HIV突变型表面糖蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示。
2.一种HIV突变型表面糖蛋白,其特征在于,所述的HIV突变型表面糖蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种DNA分子,其特征在于,它编码权利要求2所述的HIV突变型表面糖蛋白,其DNA序列为如SEQ ID NO.1所示。
4.一种HIV突变型表面糖蛋白的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
S1、用权利要求1所述的表达HIV突变型表面糖蛋白的杆状病毒感染sf9细胞,在27±3℃培养;
S2、取感染后的P0代病毒液,将杆状病毒从P0代扩增至P3代;
S3、从病毒液中分离纯化获得HIV突变型表面糖蛋白;
所述HIV突变型表面糖蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,在步骤S3中分离纯化包括以下步骤:
步骤1、收集细胞培养液离心获得上清液并使用浓缩系统浓缩得到浓缩液;
步骤2、所述步骤1所得的浓缩液通过上样泵上样,将目的蛋白结合到StrepTactinSepharose High Performance基质的固化柱中,使其结合浓缩液中的HIV突变型表面糖蛋白;
步骤3、将结合HIV突变型表面糖蛋白通过Bio-rad NGC蛋白层析系统从固化柱上洗脱下来,获得纯化的HIV突变型表面糖蛋白。
6.一种HIV突变型表面糖蛋白纳米化抗原,其特征在于,将权利要求2所述的HIV突变型表面糖蛋白包被在纳米颗粒表面,组装形成HIV突变型表面糖蛋白纳米化抗原。
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