[发明专利]一种提高病毒转染移植静脉组织效率的组合物及其转染方法与应用

权利要求书

1.一种提高病毒转染移植静脉组织效率的组合物，其特征在于，所述组合物包括温度敏感型原位凝胶。

2.根据权利要求1所述的提高病毒转染移植静脉组织效率的组合物，其特征在于，所述温度敏感型原位凝胶是质量分数大于15％的泊洛沙姆407溶液。

3.根据权利要求2所述的提高病毒转染移植静脉组织效率的组合物，其特征在于，所述组合物包括质量分数为15％～30％的泊洛沙姆407溶液和胰蛋白酶。

4.根据权利要求3所述的提高病毒转染移植静脉组织效率的组合物，其特征在于，所述泊洛沙姆407溶液的质量分数为15.25％，16.00％，16.69％，18.00％，20.00％和25.00％中的一种或多种，所述胰蛋白酶的质量分数为0.1％～1.5％。

5.根据权利要求4所述的提高病毒转染移植静脉组织效率的组合物，其特征在于，所述温度敏感型原位凝胶是质量分数为20.00％的泊洛沙姆407溶液，所述胰蛋白酶的质量分数为0.1％～1.0％。

6.根据权利要求5所述的提高病毒转染移植静脉组织效率的组合物，其特征在于，所述温度敏感型原位凝胶是质量分数为20.00％的泊洛沙姆407溶液，所述胰蛋白酶的质量分数为0.25％。

7.根据权利要求1～6任一所述的提高病毒转染移植静脉组织效率的组合物，其特征在于，所述病毒包括腺病毒、腺相关病毒、反转录病毒或单纯性疱疹病毒中的一种或多种。

8.根据权利要求7所述的提高病毒转染移植静脉组织效率的组合物，其特征在于，所述病毒为腺病毒或腺相关病毒。

9.根据权利要求1～8任一所述的提高病毒转染移植静脉组织效率的组合物的转染方法，包括如下步骤：

(1)在冷PBS溶液中加入温度敏感型原位凝胶，搅拌均匀，将其放入冰箱中保存使其完全溶解，得到温度敏感型原位凝胶水溶液；

(2)在所述温度敏感型原位凝胶水溶液中分别加入携带目的基因的病毒液、转染液和胰蛋白酶，得到混合凝胶溶液；

(3)将转染液注入移植静脉使其轻微扩张，再将所述移植静脉浸泡在所述携带目的基因的病毒液中，接着，采用血管端-端吻合术将所述移植静脉移植至颈动脉后，用生理盐水将吻合口周围冲洗干净，并将所述吻合口周围沾拭干净，最后，将所述混合凝胶溶液涂抹在所述移植静脉的血管外膜和所述吻合口周围，得到病毒转染效率提高的移植静脉组织。

10.根据权利要求9所述的提高病毒转染移植静脉组织效率的组合物的转染方法，其特征在于，所述步骤(3)中，用移液枪将所述混合凝胶溶液喷射涂抹在所述移植静脉的血管外膜和所述吻合口周围。

11.根据权利要求1～8任一所述的提高病毒转染移植静脉组织效率的组合物的应用，其特征在于，所述组合物应用于移植静脉再狭窄局部基因治疗中，提高携带目的基因病毒转染移植静脉组织的效率。

12.根据权利要求11所述的提高病毒转染移植静脉组织效率的组合物的应用，其特征在于，所述组合物应用于移植静脉再狭窄局部基因治疗中，提高携带目的基因腺相关病毒6血清型转染移植静脉血管组织的效率。