[发明专利]一种好氧反硝化菌剂的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种好氧反硝化菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1反硝化细菌的活化：将反硝化细菌菌种置于恒温摇床中于28-35℃、150-180r/min的条件下培养20-28h，然后向培养后的反硝化细菌菌种中加入灭过菌的甘油，制作含甘油体积浓度为25-35％反硝化菌储存液，将细菌储存液装入甘油管，置于冰箱中冷藏，备用；

S2反硝化细菌的扩大培养：将步骤S1中反硝化细菌甘油管中的细菌储存液接种到灭过菌的LB液体培养基中，而后置于恒温摇床中于28-35℃、150-180r/min的条件下扩大培养20-28h；获得扩大培养的反硝化细菌菌液；

S3固定化小球的制备：将步骤S2中获得的扩大培养的反硝化细菌菌液置于离心机中于转速3000-5000r/min的条件下，离心5-15min，离心结束后弃去上清液，用生理盐水清洗多次并重新悬浮于生理盐水中，制备细菌使用液；将制得的细菌使用液加入包埋剂中，搅拌混合均匀，然后将混合液逐滴加入CaCl₂溶液交联剂中，在0-10℃下交联12-36h，再用蒸馏水洗净、干燥，得到小球状的好氧反硝化菌剂；其中，包埋剂为含质量分数1-4％海藻酸钠和质量分数1-4％的羧甲基纤维素混合液，通过将海藻酸钠和羧甲基纤维素加入水中，煮沸溶解、混合均匀、冷却后获得。

2.根据权利要求1所述的一种好氧反硝化菌剂的制备方法，其特征在于：所述冷藏温度低于-18℃。

3.根据权利要求1所述的一种好氧反硝化菌剂的制备方法，其特征在于：在步骤1中，所述反硝化细菌为厌氧反硝化菌。

4.根据权利要求1所述的一种好氧反硝化菌剂的制备方法，其特征在于：在步骤3中，所述细菌使用液和包埋剂的体积比为1：(35-50)。

5.根据权利要求1所述的一种好氧反硝化菌剂的制备方法，其特征在于：在步骤3中，所述CaCl₂溶液交联剂的质量浓度为1-4％。

6.根据权利要求1所述的一种好氧反硝化菌剂的制备方法，其特征在于：在步骤3中，所述小球状的好氧反硝化菌剂粒径为3～4mm。

7.根据权利要求1-6任意一项所述的一种好氧反硝化菌剂的制备方法制备得到的好氧反硝化菌剂。

8.一种如权利要求7所述的好氧反硝化菌剂在反硝化方面的应用。