[发明专利]Wnt信号通路激活剂在制备治疗基因ALPL敲除小鼠牙硬组织矿化异常产品中的应用

说明书

本发明提供一种Wnt信号通路激活剂在制备治疗基因ALPL敲除小鼠牙硬组织矿化异常产品中的应用。动物实验揭示ALPL敲除小鼠牙硬组织矿化异常主要体现在管间牙本质减少，牙本质矿化程度低，且存在胶原网暴露，采用LiCl腹腔注射牙硬组织矿化异常的ALPL敲除小鼠，改善了牙硬组织矿化异常ALPL敲除小鼠牙硬组织矿化能力。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及Wnt信号通路激活剂在制备治疗基因ALPL敲除小鼠牙硬组织矿化异常产品中的应用。

背景技术

组织非特异性碱性磷酸酶（tissue-nonspecific alkaline phosphatase，TNAP）是由肝/骨/肾型碱性磷酸酶基因（ALPL）编码的一种蛋白，其主要功能是通过水解有机和无机焦磷酸盐释放单磷酸与钙离子结合并沉积在细胞外基质上形成钙化结晶，即矿化。临床上由于ALPL基因突变导致的遗传型疾病称为低碱性磷酸酯酶症(Hypophosphatasia，HPP)。HPP患者经常伴有牙齿早脱现象，其主要是由于牙齿及牙周组织矿化异常和牙根发育短小造成。由于遗传因素导致的牙齿早脱，目前临床上常规治疗不能根本上解决HPP患者牙齿早脱这一难题。

牙髓干细胞（Dental pulp stem cells，DPSC）是残留在牙髓组织中的一种具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞，对牙齿发育发挥重要作用。大量实验证实，牙髓干细胞可以分化成成牙本质细胞-牙本质复合体。最近研究临床试验揭示自体牙髓干细胞移植回患者自身死髓牙体中可以再生牙髓组织并伴有神经元再生能力。我们研究团队发现低碱性磷酸酯酶症患者的牙髓干细胞成骨细胞分化能力减弱，其可导致牙齿发育过程中成牙本质细胞矿化缺陷，这与低碱性磷酸酯酶症患者牙本质矿化下降高度吻合。因此，以低碱性磷酸酯酶症患者的牙髓干细胞作为寻找治疗ALPL小鼠牙硬组织矿化异常的细胞模型，筛选出有效改善ALPL敲除小鼠牙硬组织矿化异常的药物，为临床上治疗低碱性磷酸酯酶症患者牙齿矿化不足提供方法。

发明内容

本发明针对现有技术存在的问题，提供了Wnt信号通路激活剂在制备治疗基因ALPL敲除小鼠牙硬组织矿化异常产品中的应用。动物实验揭示ALPL敲除小鼠牙硬组织矿化异常，采用LiCl治疗牙硬组织矿化异常的ALPL敲除小鼠，改善了牙硬组织矿化异常的ALPL敲除小鼠的牙硬组织矿化能力。

为达到上述目的，本发明实施例采用如下技术方案：

本发明第一方面，提供了Wnt信号通路激活剂在制备治疗基因ALPL敲除小鼠牙硬组织矿化异常产品中的应用。

优选地，所述经典Wnt信号通路激活剂为LiCl。

本发明第二方面，提供一种产品，包含治疗有效量的LiCl。

优选地，所述产品为包含10mM LiCl的氯化钠注射液。

本发明第三方面，提供所述的产品在制备改善基因ALPL敲除小鼠牙硬组织矿化异常药物中的应用。

本发明第四方面，提供所述的产品在制备增加基因ALPL敲除小鼠管间牙本质小管数量或管间牙本质矿化强度产品中的应用。

优选地，所述基因ALPL为肝/骨/肾型碱性磷酸酶基因。

优选地，所述基因ALPL敲除小鼠为杂合型与杂合型小鼠交配繁殖获得的基因ALPL敲除小鼠。

本发明第五方面，提供一种改善ALPL敲除小鼠牙硬组织矿化异常的方法，包括以下步骤：

1）购买到的牙硬组织矿化异常的ALPL敲除小鼠经交配繁育得到牙硬组织矿化异常的ALPL敲除小鼠；

2）配置LiCl注射液；

3）使用LiCl注射液经腹腔注射入ALPL敲除小鼠体内，采用隔天注射方式，持续给药4周以上。