[发明专利]二氧化碳测定试剂盒及其制备方法在审
| 申请号： | 201910418475.5 | 申请日： | 2019-05-20 |
| 公开（公告）号： | CN110082344A | 公开（公告）日： | 2019-08-02 |
| 发明（设计）人： | 侯丹 | 申请（专利权）人： | 吉林瑞特生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/77 | 分类号： | G01N21/77;G01N21/33;G01N1/38 |
| 代理公司： | 长春众邦菁华知识产权代理有限公司 22214 | 代理人： | 于晓庆 |
| 地址： | 130000 吉林省长春市净月开发区新*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 二氧化碳测定 试剂盒 制备 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 磷酸烯醇式丙酮酸 苹果酸脱氢酶 表面活性剂 还原型辅酶 碳酸根离子 测试成本 单试剂 稳定剂 | ||
1.二氧化碳测定试剂盒，其特征在于，包括：浓度为50～500mmol/L的三羟甲基氨基甲烷缓冲液、浓度为1～50g/L的磷酸烯醇式丙酮酸、浓度为1～50KU/L的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、浓度为1～50KU/L的苹果酸脱氢酶、浓度为1～10g/L的还原型辅酶Ⅰ、浓度为1～20g/L的表面活性剂、浓度为0.1～5g/L的稳定剂、浓度为5～50mmol/L碳酸根离子。
2.根据权利要求1所述的二氧化碳测定试剂盒，其特征在于，包括：浓度为100mmol/L的三羟甲基氨基甲烷缓冲液、浓度为10g/L的磷酸烯醇式丙酮酸、浓度为10KU/L的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、浓度为8KU/L的苹果酸脱氢酶、浓度为2.2g/L的还原型辅酶Ⅰ、浓度为1～20g/L的表面活性剂、浓度为0.1～5g/L的稳定剂、浓度为5～50mmol/L碳酸根离子。
3.根据权利要求1所述的二氧化碳测定试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂为曲拉通X-100、吐温20或吐温80。
4.根据权利要求1所述的二氧化碳测定试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为Procline300、MIT或BND。
5.制备权利要求1至4中任意一项所述的二氧化碳测定试剂盒的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、试剂的配制
向容器中加入总配制量20～50％的纯化水，再按照配比浓度加入三羟甲基氨基甲烷，搅拌均匀使其完全溶解，再依次加入磷酸烯醇式丙酮酸、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、苹果酸脱氢酶、还原型辅酶Ⅰ、表面活性剂、稳定剂，搅拌均匀使其完全溶解，向容器中补加纯化水至总配制量，过滤，灌装于试剂瓶中，获得试剂；
步骤二、校准品的配制
向容器中加入总配制量20～50％的纯化水，再按照配比浓度加入碳酸盐，搅拌均匀使其完全溶解，向容器中补加纯化水至总配制量，过滤，灌装于试剂瓶中，获得校准品。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤一的具体过程如下：
用量筒量取纯化水500mL倒入1L烧杯中，加入三羟甲基氨基甲烷12.114g，搅拌均匀使其完全溶解，再加入磷酸烯醇式丙酮酸10.0g，搅拌均匀使其完全溶解，再加入磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶10KU、苹果酸脱氢酶8KU、还原型辅酶Ⅰ 2.2g、曲拉通X-100 2g、BND 0.3mL，搅拌均匀使其完全溶解，向容器中补加纯化水至总配制量，过滤，灌装于试剂瓶中，即为试剂。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤二的具体过程如下：
用量筒量取纯化水50mL倒入100mL烧杯中，加入碳酸氢钠0.256g，搅拌均匀，补加纯化水至100mL，过滤，灌装于试剂瓶，即为校准品。
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