[发明专利]一种酿造调味料中黄曲霉毒素样品净化检测方法及其净化枪头

说明书

本发明提供了一种酿造调味料中黄曲霉毒素样品净化检测方法及其净化枪头，检测步骤包括：样品提取，样品净化，样品排液；将移液技术与样品净化技术相结合，可以实现在液体移取的同时，完成待测样品的净化过程，大大节省了操作步骤，保证了检测精度。

技术领域

本发明属于化学分析检测技术领域，具体涉及一种酿造调味料中黄曲霉毒素样品净化检测方法及其净化枪头。

背景技术

黄曲霉毒素是一种香豆素类衍生物，由黄曲霉菌代谢产生，是剧毒的一类致癌物。黄曲霉菌多存在于湿热环境下发霉的粮食当中。而酱油醋等多种酿造调味料液体均通过粮食发酵酿造制得。因此这些调味料如若采用被黄曲霉菌污染的原料，调味料产品中也有很大可能含有黄曲霉毒素，从而影响消费者健康。

酿造调味料中的物质组成复杂多样，食品成分分析前需要对干扰的物质进行净化处理，以便顺利完成检测。常用的净化方法是固相萃取方法，①这种方法需要专门的处理设备，成本高，不利于快速检测及野外检测的环境。②在净化过程中，样品需要慢慢流经固相柱，耗时过长且操作不便。③样品在净化后需要额外步骤转移到检测设备当中进行检测。其难以避免与外界环境发生接触，容易引起二次污染，影响检测的精度。移液枪是分析检测过程必备的液体移取工具，移液精度高，广泛应用于食品、环境、生物检测领域。

发明内容

为了提高检测工作效率，提高检测精度，本发明提供一种酿造调味料中黄曲霉毒素样品净化检测方法，将移液技术与样品净化技术相结合，可以实现在液体移取的同时，完成待测样品的净化过程，大大节省了操作步骤，保证了检测精度。

本发明提供一种酿造调味料中黄曲霉毒素样品净化检测方法，检测步骤包括：(1)样品提取：取待检样品用提取溶剂定容，振荡提取，收集上清液为样品提取液；(2)样品净化：采用移液枪定量吸取样品提取液，继续定量吸取空气，鼓动样品提取液内气泡，使移液枪头内净化材料吸附杂质；(3)样品排液：将净化后的样品排出，送至检测设备上机检测。

其中，在步骤(1)中，提取步骤包括：称取5g液体调味料样品于50mL离心管中，用提取液(纯乙腈)定容到25mL，涡旋混匀；超声提取20min，放入离心机(8000r/min离心20min)，取上清液作为样品提取液。所述液体调味料优选为液态的酿造调味料，包括酱油、醋和料酒。

其中，在步骤(2)中，样品净化步骤包括：①取出枪头，安装于移液枪，将枪头伸入待净化样品液面以下，按下移液枪吸液，吸入1ml待净化样品，停留5s；②将移液枪枪头移出液面，再次按下移液枪吸液，吸入1ml空气，使液体与净化材料充分混合，重复此步骤三次，共吸入4ml空气；③移液枪显示5000ul ALL满载，将枪头对准2ml样品瓶，按下移液枪排液，收集净化液上机分析。

其中，在步骤(3)中，通过高效液相色谱(HPLC)进行分析，检测条件为：

流动相：A相，水；B相，乙腈-甲醇(50:50，v:v)；

等梯度洗脱条件：A，68％；B，32％；

色谱柱：C18柱(柱长150mm，柱内径4.6mm，填料粒径5μm)；

流速：1.0mL/min；

柱温：40℃；

进样量：50μL；

荧光检测：激发波长：360nm；发射波长：440nm，光化学柱后衍生。

本发明还提供一种适用于上述检测方法的净化枪头，其包括管体，管体内从上到下依次设置有卡扣、上筛板、净化材料和下筛板。