[发明专利]一种快速制备基因突变参考品的方法有效
| 申请号： | 201910421072.6 | 申请日： | 2019-05-13 |
| 公开（公告）号： | CN110894524B | 公开（公告）日： | 2023-05-05 |
| 发明（设计）人： | 陈钊;莫敏俐;刘阳;张艳;李东霞;刘玉忠 | 申请（专利权）人： | 嘉兴雅康博医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 李正 |
| 地址： | 314006 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 制备 基因突变 参考 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种快速制备基因突变参考品的方法，其包括以下步骤：
(1)从细胞系或临床样本中提取野生型基因组DNA；
(2)获取突变型DNA；
(3)通过拷贝数估算，配制出所需DNA浓度的初始阳性参考品；
(4)测定初始阳性参考品中靶基因的实际突变比例a，0＜a＜1；
(5)将相同DNA浓度的初始阳性参考品与野生型基因组DNA按1:Q的体积比混合，获得所需的突变比例为b的阳性参考品，其中0＜b＜a，并且Q＝(1/b-1)/(1/a-1)-1。
2.权利要求1所述的方法，其中突变型DNA是通过如下方法获得的：通过分子克隆技术构建含有靶基因突变序列的质粒，并提取质粒DNA，其中靶基因为100％突变型。
3.权利要求1所述的方法，其中突变型DNA是通过如下方法获得的：通过PCR获得含有靶基因突变序列的PCR产物，并纯化PCR产物DNA，其中靶基因为100％突变型。
4.权利要求1所述的方法，其中野生型基因组DNA是血浆游离DNA。
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