[发明专利]一种肠道菌群啮齿动物模型的构建方法在审

专利信息
申请号: 201910421664.8 申请日: 2019-05-21
公开(公告)号: CN110150226A 公开(公告)日: 2019-08-23
发明(设计)人: 许安;刘颖;程雷;杨振;汪童;丁晗 申请(专利权)人: 中国科学院合肥物质科学研究院
主分类号: A01K67/02 分类号: A01K67/02
代理公司: 合肥市浩智运专利代理事务所(普通合伙) 34124 代理人: 王亚洲
地址: 230031 安徽*** 国省代码: 安徽;34
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摘要:
搜索关键词: 肠道菌群 啮齿动物模型 散剂 电解质 聚乙二醇 构建 建模 研究技术领域 啮齿类动物 模型建立 实验对象 重复率 灌胃 小鼠 研究
【说明书】:

发明公开一种肠道菌群啮齿动物模型的构建方法,涉及及肠道菌群研究技术领域,该方法以小鼠为实验对象,灌胃聚乙二醇电解质散剂,即得到用于肠道菌群研究的啮齿类动物模型;所述聚乙二醇电解质散剂的使用方法为每天使用两次,间隔时间为4h;该方法的有益效果在于:建模时间短,从开始建模到模型建立仅需8小时,方法快速简单可行,效果显著,无副作用,重复率高。

技术领域

本发明涉及肠道菌群研究技术领域,具体涉及一种肠道菌群啮齿动物模型的构建方法。

背景技术

正常生理条件下,人体肠道内至少含有1000种不同的菌种,这些菌群所携带的基因数是人体自身基因的100倍以上,宿主与肠道菌群之间互惠互利的动态平衡在维持机体各项功能中发挥着极为重要的作用。随着研究的深入,肠道菌群与机体疾病与健康的关系日益清晰,其对机体免疫系统、循环系统、中枢神经系统和消化系统正常功能的维持均有着不可替代的作用,肠道菌群失调可能会导致和/或加重多种疾病的发生发展,如癌症和阿尔兹海默症等。

当前,肠道菌群是学术界热点之一,但对其研究尚处于探索阶段,很多问题亟待深入研究,例如:肠道菌群影响机体免疫和代谢的途径和机制;肠道菌群中致病菌或致病代谢产物的筛选鉴定;致病菌或致病代谢产物作用机制及与其他因素(如基因型)的交联作用;肠道菌群中有益菌或有益代谢产物的分离鉴定及其作用机制的研究等等。因此,迫切需要一种合适的动物模型来研究肠道菌群与机体相互作用及筛选与鉴定肠道菌群中有益和/或有害成分。

当前,针对清除啮齿类动物肠道微生物的常规方法是使用抗生素,即长期联合使用多种不同抗生素,达到减少肠道微生物的目的。但此方法存在多种不足:(1)使用抗生素效果有限,无法达到清除肠道微生物的目的,仅能降低肠道微生物含量,作用有限;(2)抗生素需长期使用,否则无法达到降低肠道微生物的目的;(3)长期使用抗生素存在耐药性和副作用。因此,亟需构建一种新型快速安全的方法来研究肠道菌群在机体免疫和循环代谢中的作用和意义。

发明内容

本发明解决的技术问题在于利用抗生素减少肠道微生物所带来的不足,提供一种肠道菌群啮齿动物模型的构建方法。

本发明是采用以下技术方案解决上述技术问题的:

本发明提供一种肠道菌群啮齿动物模型的构建方法,该方法以小鼠为实验对象,灌胃聚乙二醇电解质散剂,即得到用于肠道菌群研究的啮齿类动物模型;所述聚乙二醇电解质散剂的使用方法为每天使用两次,间隔时间为4h。

优选的,所述聚乙二醇电解质散剂的使用量为:经口灌胃1mL/次/只。

优选的,所述聚乙二醇电解质散剂包括以下原料氯化钾、碳酸氢钠、氯化钠、硫酸钠、聚乙二醇制成。

优选的,所述聚乙二醇电解质散剂的制备方法为将0.74g氯化钾、1.68g碳酸氢钠、1.46g氯化钠、5.68g硫酸钠、60g聚乙二醇4000混合后,溶于1000mL双蒸水中。

优选的,在灌胃聚乙二醇电解质散剂前,小鼠禁食固体食物。

优选的,所述小鼠选取2月龄雄性C57BL/6小鼠。

优选的,所述选取的小鼠无特定病原体,体重30±2.0g。

优选的,所述小鼠的饲养方法为将小鼠饲养于屏障环境中,每日所需的食物和水经过灭菌处理,自由进食进水。

优选的,还包括菌群移植模型的验证步骤:通过qRT-PCR方法检测小鼠肠道菌群量和优势菌群量,用以验证菌群移植模型是否建立成功。

优选的,还包括检测建模方法副作用的步骤:通过Elisa法检测小鼠体内白介素-1β和白介素-6含量,通过化学比色法测定小鼠体内乳酸脱氢酶含量,以检测建模方法的副作用。

本发明的有益效果在于:

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