[发明专利]一种评价植物叶中甲醛脱氢酶活性大小的方法

说明书

本发明公开了一种评价植物叶中甲醛脱氢酶活性大小的方法，尤其涉及植物净化空气中的甲醛。所用方法采用高温处理的方式，消除叶提取液中甲醛脱氢酶的活性，根据新鲜提取液和失活提取液对外加甲醛净化能力间的差异，评价植物叶中甲醛脱氢酶活性大小。在外加甲醛浓度为3.12mmol/L时，植物叶中甲醛脱氢酶对外加甲醛的贡献率为1%~73%。实验结果表明，常春藤、碰碰香、草莓吊兰对外加甲醛的贡献率为20%~57%，对开发高效净化植物的快速筛选方法具有重要意义。

技术领域

本发明涉及一种能够评价甲醛脱氢酶活性的方法，尤其涉及植物叶中甲醛脱氢酶活性大小的评价。

背景技术

室内装修带来的甲醛污染已受到广泛关注，是困扰居民身体健康的严峻问题。甲醛的来源广泛、危害性大、持续时间长，已成为我国普遍存在且较为严重的室内污染物之一，其致癌性已得到了国际权威机构的确认。现在控制室内甲醛污染的途径主要有物理方法、化学方法、生物方法。由于物理方法和化学方法效果不理想且局限性较大，因此利用绿色植物吸收室内装修产生的甲醛成为当今研究的热点。

植物净化空气中的甲醛作为一种安全的、有效的、简便的绿色技术受到广泛的关注，但目前研究大部分主要集中对植物净化甲醛机理中的超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶的研究，对植物净化甲醛机理中甲醛脱氢酶方面的研究较少。植物中甲醛脱氢酶是外源甲醛转化的主要催化剂。在植物受到外源甲醛的毒害作用时，植物依靠其自身体内的甲醛脱氢酶作用去除甲醛。所以建立一种能够评价植物叶中甲醛脱氢酶活性大小的方法尤为重要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种简单、快速、成本低廉、高效评价植物叶中甲醛脱氢酶活性大小的方法。

本发明采用的技术方案如下：

植物叶中的甲醛脱氢酶热稳定性较差，高温时易失去活性。因此，采用高温处理的方式，消除叶提取液中甲醛脱氢酶的活性，根据新鲜提取液和失活提取液对外加甲醛净化能力间的差异，有效评价植物叶中甲醛脱氢酶的活性大小。

一种评价植物叶中甲醛脱氢酶活性大小的方法，步骤如下：

1、植物样品均在校内草坪、花园、荒地及校外公园空气清新、土壤无污染历史处采集，由识花君软件鉴别植物名称；

2、将步骤(1)中的新鲜植物经冰盒保鲜短途运送回来后，经过仔细地与土壤分离，用去离子水彻底冲洗，拭干，快速、准确称量处理好的样品2 g；

3、把步骤(2)中植物置于冷冻的瓷研钵中，在低温保护下以40 mL磷酸盐缓冲溶液（pH=7.8）为提取剂，在瓷研钵中快速充分研磨、提取出新鲜植物中的有效成份，转移至预冷的50mL离心管中；

4、摇匀步骤(3)中所得的上清液，一部分迅速置于0-4℃条件下离心、待用，另一部分置于试管中放入100℃水中加热10 min，取出冷却、离心后待用；

5、吸取步骤(4)离心好新鲜或失活植物提取液0.5 mL于10 mL具塞比色管中。每三个具塞比色管为一组平行样。加入0μL、100μL、200μL、300μL、400μL甲醛（250 mg/L）、0.5 mL乙酰丙酮后定容摇匀，置于60℃水浴锅中加热15 min后，冷却、过滤、稀释，在波长 414 nm 处，以水为参比，测定滤出液的吸光度；

6、根据步骤(5)测定出的吸光度值，计算净化实验中不同条件下植物叶新鲜提取液和失活提取液对外加的甲醛净化量（mmol·kg^-1 FW），根据新鲜提取液和失活提取液对外加甲醛净化能力间的差异，评价植物叶中甲醛脱氢酶的活性大小。在外加甲醛浓度为3.12mmol/L时，植物叶中甲醛脱氢酶对外加甲醛的贡献率为1%~73% ；植物对外加甲醛的净化量=测定吸光度值/提取剂总体积/植物鲜重/0.5 mL。

本发明与现有技术相比具有以下优点：