[发明专利]抗菌肽H5-p5及其制备方法和应用

说明书

一种抗菌肽H5‑p5，所述抗菌肽H5‑p5由18个氨基酸残基组成，分子量2423.12 Da，净电荷数为+10，等电点11.78，其氨基酸序列为Tyr‑Ile‑Arg‑Lys‑Ile‑Arg‑Arg‑Phe‑Phe‑Lys‑Lys‑Leu‑Lys‑Lys‑Ile‑Leu‑Lys‑Lys‑NH₂。该抗菌肽H5‑p5具有分子量小、人工合成简单、抗菌作用显著、对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抑制作用强，溶血活性低的优点，具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于生物化学技术领域，具体涉及抗菌肽H5-p5的制备和该抗菌肽在制备抗菌药物中的应用。

背景技术

自从青霉素等抗生素被发现以来，针对细菌感染性疾病的治疗有了根本的改善，抗生素的使用拯救了无数病人的生命，延长了人类的平均寿命。但随着抗生素的大规模使用或滥用，尤其是在发展中国家，导致了一些抗药性细菌的产生和扩散，其中包括一些毒力很强的致病菌，像耐甲氧西林葡萄球菌与肺炎链球菌等。因此，寻找安全有效且不易产生耐药性质的抗菌药物成为全世界科学家竞争和努力的方向。

抗菌肽是当生物受到微生物侵入后机体迅速产生的高效、广谱的免疫分子，一般由12到100个氨基酸组成。抗菌肽广泛存在于不同类型生物体中，目前已从微生物、植物、两栖动物、海洋脊椎动物、哺乳动物甚至人体内鉴定出上千种抗菌肽。抗菌肽抗菌机理复杂，但大多数理论都认为其机制涉及到抗菌肽的阳离子性和疏水性与带负电荷的微生物细胞膜的作用，抗菌肽和细菌的细胞膜接触后，引起膜通透性改变，或在细菌细胞膜上形成跨膜的孔洞，最后导致细菌内容物外泄而死亡。抗菌肽对细菌的作用几乎都是致死性的，不易产生耐药性。因此，抗菌肽杀灭细菌的效率远远高于传统的抗生素。

抗菌肽的发现和快速发展为开发新型抗菌药物提供了巨大的资源库，也为解决临床耐药菌株的问题提供了极大的可能性，在医药卫生、农业生产、食品工业等领域都有广泛的应用前景。随着人们对抗菌肽抗菌机理的进一步认识和新的抗菌肽的发现，人们不仅可以从生物体内直接分离纯化得到抗菌肽，也可以利用基因工程手段重组得到抗菌肽，又可以直接利用化学合成手段在短时间内合成大量小分子抗菌肽。

天然来源的抗菌肽部分会因为分子量较大存在免疫原性，抗菌活性低，对宿主细胞有细胞毒作用，或会引起溶血等方面限制了抗菌肽作为抗菌药物的推广应用，因此，寻找分子量更小，抗菌活性更强，尤其是不引发溶血或细胞毒作用的抗菌肽才是解决抗菌肽作为抗菌药物推广的最关键的因素。近几年来，科学家们在寻找新型抗菌肽的同时也开始致力于对原有的天然抗菌肽进行结构改造或重新设计，比方说更换某些氨基酸残基或根据需要直接设计抗菌肽氨基酸的一级结构，以期获得活性更高、更有针对性同时对宿主细胞无毒害作用的抗菌肽。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的具有药用价值的抗菌肽H5-p5及制备。

本发明的另一目的在于提供上述抗菌肽在制备抗菌药物方面或保健品或漱口水中的用途。

一种抗菌肽H5-p5，所述的抗菌肽H5-p5的氨基酸序列为：Tyr-Ile-Arg-Lys-Ile-Arg-Arg-Phe-Phe-Lys-Lys-Leu-Lys-Lys-Ile-Leu-Lys-Lys-NH₂

（酪氨酸-异亮氨酸-精氨酸-赖氨酸-异亮氨酸-精氨酸-精氨酸-苯丙氨酸-苯丙氨酸-赖氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-赖氨酸-异亮氨酸-亮氨酸-赖氨酸-赖氨酸-NH₂）。所述抗菌肽H5-p5全序列的C-端酰胺化。

本方案的具体特点还有，它包含18个氨基酸残基，分子量2423.12 Da，等电点11.78。

一种如上所述的抗菌肽H5-p5的制备方法，根据其氨基酸序列，用自动多肽合成仪合成其全序列，通过HPLC反相柱层析脱盐纯化。