[发明专利]杨小舟蛾谷胱甘肽S-转移酶MtGSTd2基因启动子与应用有效
申请号: | 201910426926.X | 申请日: | 2019-05-21 |
公开(公告)号: | CN111979231B | 公开(公告)日: | 2022-12-02 |
发明(设计)人: | 汤方;涂慧珍 | 申请(专利权)人: | 南京林业大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10 |
代理公司: | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人: | 邱兴天 |
地址: | 210037 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 小舟 谷胱甘肽 转移酶 mtgstd2 基因 启动子 应用 | ||
本发明公开了一种杨小舟蛾谷胱甘肽S‑转移酶MtGSTd2基因启动子与应用,属于基因工程技术领域,该杨小舟蛾谷胱甘肽S‑转移酶MtGSTd2基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明成功克隆出杨小舟蛾MtGSTd2基因启动子,试验证实,该启动子可用于在宿主细胞中启动下游基因表达,尤其是在植物次生物质诱导下能够启动下游基因表达,可以为植物次生物质对于杨小舟蛾MtGSTd2基因表达调控具体作用机制提供理论基础,为杨树食叶害虫新的防治技术提供理论依据和基因序列,也可以为培育出对有毒物质具有更高抗性的昆虫细胞或转基因家蚕提供备选基因。
技术领域
本发明属于基因工程技术领域,更具体地说,涉及一种杨小舟蛾谷胱甘肽S-转移酶MtGSTd2基因启动子与应用。
背景技术
在长期的演化中,植物和昆虫之间的密切的相互关系在很大程度上体现在植物次生物质的多样性上,昆虫演化了精确的适应性和抗性与之相适应。昆虫对植物次生物质的抗性主要包括代谢抗性、靶标抗性和行为抗性,一系列解毒酶系的出现是昆虫适应性的主要方式之一。谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-transferase,GSTs)、羧酸酯酶(Caboxyle-sterase,CarE)和细胞色素P450(CytochromeP450,CYP450)是昆虫体内最重要的三大解毒酶系。其中GSTs属于II相代谢反应的重要转移酶,通过内源谷胱甘肽与有害的亲电子基团结合并排出体外或以非共价结合的蛋白质和疏水配基相结合,解除内源性或外源性毒物质的影响,从而起到解毒作用。
启动子是基因表达调控的重要顺式元件,在基因的表达调控中转录环节是最主要的调控位点,而启动子的调控在转录环节中又占据着十分重要的地位;植物次生物质可诱导昆虫体内GSTs等解毒酶活性,有利于昆虫解毒。因此,有理由相信植物次生物质对GSTs基因启动子很可能具有重要的调控功能。
发明内容
发明目的:针对现有技术存在的上述问题,本发明的目的在于提供一种杨小舟蛾GSTs基因启动子,在植物次生物质诱导下可在宿主细胞中被启动。本发明的另一目的在于提供杨小舟蛾GSTs基因启动子序列的载体,可启动下游基因在宿主细胞中表达。本发明还有一目的是提供杨小舟蛾GSTs基因启动子序列的载体的应用方法,可用于提高昆虫细胞对有毒物质抗性。
技术方案:为了解决上述问题,本发明所采用的技术方案如下:
一种杨小舟蛾谷胱甘肽S-转移酶MtGSTd2基因启动子,其核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。
一种表达载体,含有所述的杨小舟蛾谷胱甘肽S-转移酶MtGSTd2基因启动于。
一种宿主细胞,含有所述的表达载体。
优选的,所述的宿主细胞为昆虫细胞。
所述的杨小舟蛾谷胱甘肽S-转移酶MtGSTd2基因启动子在宿主细胞中启动下游基因表达的应用。
所述的杨小舟蛾谷胱甘肽S-转移酶MtGSTd2基因启动子在提高昆虫细胞对有毒物质抗性中的应用。
所述的杨小舟蛾谷胱甘肽S-转移酶MtGSTd2基因启动子在启动表达MtGSTd2基因中的应用
有益效果:相比于现有技术,本发明成功克隆出杨小舟蛾MtGSTd2基因启动子,试验证实,该启动子可用于在宿主细胞中启动下游基因表达,尤其是在植物次生物质诱导下能够启动下游基因表达,可以为植物次生物质对于杨小舟蛾MtGSTd2基因表达调控具体作用机制提供理论基础,为杨树食叶害虫新的防治技术提供理论依据和基因序列,也可以为培育出对有毒物质具有更高抗性的昆虫细胞或转基因家蚕提供备选基因。
附图说明
图1为杨小舟蛾幼虫DNA电泳图;
图2为杨小舟蛾MtGSTd2启动子PCR产物的电泳检测结果图;图中,M:Marker,2:MtGSTd2启动子;
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