[发明专利]一种用于辅助诊断前列腺增生症的试剂盒

说明书

本发明提供一种用于辅助诊断前列腺增生症的试剂盒，包括与GPER结合的一抗，生物素标记的二抗，链霉菌抗生物素蛋白‑过氧化物酶，显色试剂，磷酸缓冲盐溶液。本发明研究了GPER的表达水平跟前列腺增生症的关系，发现GPER能作为前列腺增生症患者疾病诊疗的新的参考指标，采用本发明试剂盒的检测方法操作简单、快速，检测灵敏度和特异性高，可达到对选定临床样本进行定性及半定量检测，无需其他特殊仪器，临床样本保存时间长，一般医院实验室或者病理室都可以完成。该试剂盒有望成为前列腺增生症术后疾病诊断的新技术。

技术领域

本发明涉及一种用于辅助诊断前列腺增生症的试剂盒。

背景技术

前列腺增生症(BPH)是世界范围内老年男性常见的泌尿系统疾病之一，几乎每个老年男性都会遇到这个问题，只是增生的程度不同。临床治疗前列腺增生症的常见手段有手术、药物治疗等，但手术治疗对于某些患者的风险较大，药物治疗起效缓慢等问题，前列腺增生症的生物分子标靶疗法是未来研究的一个方向之一。

GPER(G protein-coupled estrogen receptor)是一类七次跨膜的G蛋白偶联受体，被发现在心脏、大脑、胃肠道、卵巢、肝脏以及卵巢等组织。GPER是一种属于位于细胞膜上的新型雌激素受体，这和传统的细胞核的经典雌激素受体ERα/β不同，GPER可以通过一系列的快速途径影响细胞的功能状态。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于辅助诊断前列腺增生症的试剂盒，本发明提供了GPER在制备辅助诊断前列腺增生症的试剂或试剂盒中的用途。

为实现上述目的，本发明所采取的技术方案：一种用于辅助诊断前列腺增生症的试剂盒，包括与GPER结合的一抗，生物素标记的二抗，链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶，显色试剂，磷酸缓冲盐溶液。

优选地，所述一抗为兔源抗GPER多克隆抗体。

优选地，所述显色试剂为DAB。

优选地，所述试剂盒还包括内源性过氧化物酶阻断剂。

优选地，所述试剂盒还包括动物非免疫血清。

本发明提供了GPER在制备辅助诊断前列腺增生症的试剂或试剂盒中的用途。

本发明提供了检测GPER的试剂在制备辅助诊断前列腺增生症的试剂盒中的用途。

本发明试剂盒使用方法如下：

1)将临床组织从液氮中取出，将该组织装入包埋盒中保存；

2)用自来水连续冲洗5小时；

3)放入leica自动脱水机中进行组织脱水；

4)进行石蜡包埋组织；

5)将包埋好的石蜡组织块进行连续切片，厚度约为4μm；

6)将切好的片子在60℃的恒温烤箱中放置约2个小时；

7)放入leica自动脱蜡机中进行组织切片脱蜡(包括二甲苯和梯度酒精脱蜡)

8)蒸馏水冲洗一下，将切片置于枸橼酸抗原修复液中(注意过程中液体量足够以免微波炉加热时烧干)进行抗原修复，微波炉加热3min,拿出来凉一下，再加热1min，再拿出来室温冷却一下，再加热1min，冷却至室温；

9)用阻水笔把切片组织圈住，用PBS浸泡；

10)每张切片加50ul过氧化酶阻断溶液，以便灭活组织内源性过氧化物酶，室温孵育15分钟；

11)PBS冲洗或浸泡3×3min；

12)甩去PBS液，每张组织切片加50ul的非免疫性动物血清封闭非特异性结合，室温下孵育10-15分钟；