[发明专利]癌胚抗体和聚苯胺@金的结合物制备及其构建光热免疫传感器检测癌胚抗原的方法在审
申请号: | 201910427228.1 | 申请日: | 2019-05-22 |
公开(公告)号: | CN110133266A | 公开(公告)日: | 2019-08-16 |
发明(设计)人: | 张冰;丁传敏;贾晔婧 | 申请(专利权)人: | 太原理工大学 |
主分类号: | G01N33/574 | 分类号: | G01N33/574;G01N33/531 |
代理公司: | 太原市科瑞达专利代理有限公司 14101 | 代理人: | 李富元 |
地址: | 030024 山西*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 聚苯胺 癌胚 抗体 金复合物 结合物 制备 氯金酸水溶液 金纳米颗粒 免疫传感器 癌胚抗原 光热 构建 己烷 癌胚抗原检测 肿瘤标志物 苯胺溶液 离心清洗 离心收集 用水冲洗 混合物 检测 预热 孵育 水浴 丢弃 震荡 生长 | ||
1.癌胚抗体和聚苯胺@金的结合物制备方法,其特征在于:按照如下的步骤进行
步骤一、将氯金酸水溶液置于45℃水浴中预热10 min,之后在氯金酸水溶液上缓慢地加入溶于己烷的苯胺溶液,将以上混合物在45℃孵育过夜,当聚苯胺@金纳米颗粒生长完成后,水相表面的己烷被丢弃,离心收集聚苯胺@金纳米颗粒,用水冲洗几次,即得聚苯胺@金复合物,记为PANi@Au;
步骤二、取上述制备好的聚苯胺@金复合物,然后加入癌胚抗体anti-CEA,震荡过夜,最后离心清洗得到癌胚抗体和聚苯胺@金的结合物,记为anti-CEA-PANi@Au。
2.根据权利要求1所述的癌胚抗体和聚苯胺@金的结合物制备方法,其特征在于:步骤一中氯金酸的量5-9a毫升,浓度为0.55毫克/毫升;正己烷的量为0.5-0.9a毫升,质量分数为99.5 %;苯胺的量为9.2-16.6a微升,质量分数为99.5 %;步骤二中聚苯胺@金复合物的量为1-1.8a毫升;癌胚抗体的量为100-180a微升,浓度为0.01毫克/毫升;a为正整数。
3.利用权利要求1制备的聚苯胺@金复合物构建光热免疫传感器检测癌胚抗原的方法,其特征在于:使用癌胚抗体包被板同时孵育不同浓度的癌胚抗原CEA和anti-CEA-PANi@Au,然后用蒸馏水清洗3-5次,构建成光热免疫传感器,加入定量的蒸馏水,在波长为808 nm的近红外激光下照射5 min,通过温度计检测温度变化定量分析癌胚抗原的浓度。
4.根据权利要求3所述的聚苯胺@金复合物构建光热传感器检测癌胚抗原的方法,其特征在于:anti-CEA-PANi@Au的量为100-180b微升;癌胚抗原的量为100-180b微升;b为正整数。
5.根据权利要求3所述的聚苯胺@金复合物构建光热免疫传感器检测癌胚抗原的方法,其特征在于:依次孵育不同浓度的癌胚抗原和anti-CEA-PANi@Au是指将依次在浓度为0纳克/毫升、0.1纳克/毫升、0.5纳克/毫升、1纳克/毫升、3纳克/毫升、5纳克/毫升、10纳克/毫升、25纳克/毫升的癌胚抗原和anti-CEA-PANi@Au的混合液中保持在室温孵育40 分钟。
6.根据权利要求3所述的聚苯胺@金复合物构建光热免疫传感器检测癌胚抗原的方法,其特征在于:通过温度计检测温度变化来定量癌胚抗原的浓度是指癌胚抗原浓度与温度变化成线性相关性,对应的线性方程为y=6.2895 log(x) + 15.6468,其中,x是癌胚抗原的浓度,单位是纳克/毫升,y是检测的温度变化。
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