[发明专利]一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法

权利要求书

1.一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1：在不同溶液pH条件下进行CMP和GMP在超高交联吸附树脂XDA-1上的吸附平衡实验；

步骤2：选取2.0作为后续固定床分离的上样pH，pH=2.0的盐酸作为CMP的洗脱剂，去离子水作为GMP的洗脱剂；

步骤3：将CMP和GMP的混合液通入到超高交联吸附树脂XDA-200固定床中进行吸附，固定床高径比为10:1～25:1，上样量为1mg/g树脂～20 mg/g树脂；

步骤4：进行CMP和GMP的洗脱。

2.根据权利要求1所述的一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法，其特征在于：所述步骤3中CMP和GMP混合溶液的获得方法具体为：

步骤3-1：采用核酸酶P1对酵母RNA溶液进行水解，获得四种5′-核糖核苷酸的混合物；

步骤3-2：将RNA酶解液通入到一种弱极性超高交联吸附树脂XDA-200固定床中进行色素脱除；

步骤3-3：将脱色后的酶解液采用一种732型强酸性阳离子交换树脂进行分离，收集其中的CMP和GMP混合组分，即为步骤3中所用的CMP和GMP混合液。

3.根据权利要求1所述的一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法，其特征在于：所述步骤4中进行CMP和GMP的洗脱具体步骤为，首先用pH为2的盐酸作为洗脱剂进行洗脱，待CMP接近完全流出时，换成去离子水进行洗脱，洗脱流速为0.5～3 BV/h，柱温控制为25℃。