[发明专利]抗感冒颗粒的指纹图谱检测方法

权利要求书

1.一种抗感冒颗粒的指纹图谱检测方法，其特征在于，它包括以下步骤：

步骤1、抗感冒颗粒供试品溶液的制备：

取适量抗感冒颗粒，粉碎，精密称定粉末0.5g，加入甲醇30ml，回流提取2h，放冷过滤，滤液蒸干定容至2ml容量瓶，放入离心管以6000r/min转速，离心5分钟，取上清液用0.45μm有机微孔滤膜滤过，取续滤液，即得待测供试品溶液；

步骤2、混合对照品溶液的制备：

分别取绿原酸、黄芩苷、升麻素苷、甘草素和木犀草苷对照品适量，精密称定，置于10ml容量瓶中，加甲醇配成浓度分别为1000μg/ml、1050μg/ml、1290μg/ml、208μg/ml、250μg/ml的绿原酸、黄芩苷、升麻素苷、甘草素和木犀草苷的对照品储备液；分别精密取绿原酸、黄芩苷、升麻素苷、甘草素和木犀草苷的对照品溶液适量，加甲醇定容至20ml，制成每1ml含绿原酸100μg、黄芩苷105μg、升麻素苷129μg、甘草素20.8μg、木犀草苷25.0μg的混合对照品溶液；

步骤3、分别精密吸取按步骤1方法得到的抗感冒颗粒供试品溶液和步骤2的混合对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；

步骤4，将步骤3中获得的抗感冒颗粒供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A；选择不同批次抗感冒颗粒的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成抗感冒颗粒的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分;

步骤3高效液相色谱仪检测的色谱条件为：色谱柱为Purospher STAR LP RP-18endcapped，规格为4.6*250mm，5μm；以体积浓度0.1%甲酸水作为流动相A，以甲醇为流动相B，梯度洗脱，流速为1ml·min^-1，柱温30℃，检测波长254nm；梯度洗脱如下：

时间/min	流动相A体积百分比	流动相B体积百分比
0	95	5
30	70	30
60	70	30
120	30	70

。

2.根据权利要求1所述的一种抗感冒颗粒的指纹图谱检测方法，其特征在于，得到的抗感冒颗粒指纹图谱中有5个共有峰，各共有峰的保留时间分别为：共有峰1，保留时间为26.724min；共有峰2，保留时间为48.085min；共有峰3，保留时间为66.666min；共有峰4，保留时间为79.943min；共有峰5，保留时间为85.32min。

3.根据权利要求2所述的一种抗感冒颗粒的指纹图谱检测方法，其特征在于，其中，1号峰为绿原酸，2号峰为升麻素苷，3号峰为木犀草苷，4号峰为甘草素，5号峰为黄芩苷。