[发明专利]基于甜菜碱的核酸探针及其应用

说明书

本发明公开了一种基于甜菜碱的核酸探针及其应用，所述核酸探针包括核酸标记体系及添加于核酸标记体系中的甜菜碱和/或甜菜碱类似物。本发明中通过在核酸标记体系中添加甜菜碱及甜菜碱类似物，可以显著改善核酸的标记效率，特别是高GC含量的核酸探针的标记效率提高尤为显著，并且具有成本较低的优点。

技术领域

本发明涉及核酸标记技术领域，特别是涉及一种基于甜菜碱的核酸探针及其应用。

背景技术

核酸，包括核糖核酸(RNA)、脱氧核糖核酸(DNA)以及核糖核酸和脱氧核糖核酸的嵌合物(单一链中包含核糖核苷和脱氧核糖核苷)或杂合物(双链的两条链分别为RNA和DNA，或至少有一条链为嵌合物)，经常需要使用生物素、地高辛或同位素等进行标记，用于核酸、核酸和蛋白等分子的相互作用的检测。标记的核酸常被称为核酸探针，标记的核酸探针包括单链核酸探针和双链核酸探针。

现有技术中，对于一些核酸标记效率相对较低，特别是对于一些高GC含量的序列标记效率相对较低，对于后续的Northern、Southern、克隆或平板、点杂交或狭缝杂交、原位杂交、电泳迁移率改变检测(EMSA)等涉及到核酸的或核酸与蛋白等其它分子相互作用的检测带来不便。

因此，针对上述技术问题，有必要提供一种基于甜菜碱的核酸探针及其应用。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种基于甜菜碱的核酸探针及其应用。

为了实现上述目的，本发明一实施例提供的技术方案如下：

一种基于甜菜碱的核酸探针，所述核酸探针包括核酸标记体系及添加于核酸标记体系中的甜菜碱和/或甜菜碱类似物。

作为本发明的进一步改进，所述甜菜碱类似物包括硫代甜菜碱、丝氨酸甜菜碱、丙氨酸甜菜碱、γ-氨基丁酸甜菜碱、高丝氨酸甜菜碱中的一种或多种。

作为本发明的进一步改进，所述甜菜碱和/或甜菜碱类似物的浓度范围为10mmol/L～5mol/L。

作为本发明的进一步改进，所述甜菜碱和/或甜菜碱类似物的浓度范围为100mmol/L～3mol/L。

作为本发明的进一步改进，所述甜菜碱和/或甜菜碱类似物的浓度范围为200mmol/L～2mol/L。

作为本发明的进一步改进，所述核酸标记体系包括基于核酸模板的酶促合成、直接化学合成、3’末端标记、5’末端标记中的任意一种。

作为本发明的进一步改进，所述基于核酸模板的酶促合成包括聚合酶链式反应、Klenow酶催化的缺口平移中的一种或多种；所述直接化学合成包括使用各种核酸合成仪在核酸合成过程中掺入标记的核苷酸；所述3’末端标记包括基于TdT酶的末端标记；所述5’末端标记体系包括5’末端磷酸化标记。

作为本发明的进一步改进，所述核酸标记体系采用生物素、地高辛、同位素中任意一种或多种进行标记。

本发明一实施例提供的技术方案如下：

一种基于甜菜碱的核酸探针的应用，所述核酸探针用于Northern、Southern、克隆或平板、点杂交或狭缝杂交、原位杂交、电泳迁移率改变检测、ELISA。

本发明的有益效果是：

本发明中通过在核酸标记体系中添加甜菜碱及甜菜碱类似物，可以显著改善核酸的标记效率，特别是高GC含量的核酸探针的标记效率提高尤为显著，并且具有成本较低的优点；

本发明的核酸探针可应用于各种涉及到核酸检测或核酸与蛋白等其它分子相互作用的检测。

附图说明