[发明专利]一种基于生物传感器的检测痕量银离子的方法

权利要求书

1.一种基于生物传感器的检测痕量银离子的方法，其特征在于，将富含C碱基的核酸链probe DNA 通过Au-S键固定到金电极表面，加入AuNPs标记的富含C碱基的核酸链linkDNA，所述link DNA通过碱基互补与probe DNA形成双链DNA, 在银离子存在时，C-Ag⁺-C结构大量形成，引起AuNPs聚集在金电极表面，引起电化学信号改变，通过对电化学信号强度的测定，测得溶液中银离子的浓度。

2.根据权利要求1所述的一种基于生物传感器的检测痕量银离子的方法，其特征在于，包含以下步骤：

（1）柠檬酸盐-AuNPs溶液的制备：将去离子水加入双颈烧瓶中，加入HAuCl₄，加热回流，迅速加入柠檬酸钠溶液，继续回流20分钟，停止加热并让系统在搅拌下冷却至室温；

（2）link DNA-AuNPs溶液的制备：将link DNA与柠檬酸盐-Au NPs均匀混合，然后将混合物放入实验室冷冻箱2小时，在室温下解冻，离心后去除上清，将沉淀溶于Tris-乙酸盐缓冲液中；

（3）probe DNA标记的金电极的制备： 用Al₂O₃粉末打磨金电极，在probe DNA中加入TCEP活化，在打磨后的金电极表面滴加活化后的probe DNA并孵育1小时，随后用MCH封闭2小时，去离子水冲洗后电极用氮气吹干，存放于Tris缓冲液中备用；

（4）银离子的检测：将待测银离子溶液与link DNA-AuNPs溶液混合，滴在电极表面在4℃下孵育2小时，使用电化学工作站进行电化学信号强度的测定，根据标准曲线，确定所述银离子的浓度。

3.根据权利要求2所述的一种基于生物传感器的检测痕量银离子的方法，其特征在于，所述步骤（2）中的金电极的打磨方法为：在麂皮上依次用直径为1.0，0.3和0.05 μm的α-Al₂O₃粉末打磨金电极，每种粉末打磨5分钟。

4.根据权利要求2所述的一种基于生物传感器的检测痕量银离子的方法，其特征在于，所述步骤（3）中，probe DNA与TCEP的当量比为1:5。

5.根据权利要求1或2所述的一种基于生物传感器的检测痕量银离子的方法，其特征在于，所述电化学信号强度的测定方法为微分脉冲伏安法。

6.根据权利要求1或2所述的一种基于生物传感器的检测痕量银离子的方法，其特征在于，所述probe DNA的DNA序列为：SEQ ID NO.1。

7.根据权利要求1或2所述的一种基于生物传感器的检测痕量银离子的方法，其特征在于，所述link DNA的序列为：SEQ ID NO.2。