[发明专利]靶向抑制肺癌及其干细胞增殖、转移的活性组合物的制法

权利要求书

1.靶向抑制肺癌及其干细胞增殖、转移的活性组合物的制法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)取蒲公英、石见穿、仙鹤草、贯叶连翘和牛蒡子依次进行清洗、烘干、粉碎，得到粉碎原料；

(2)向所述粉碎原料中加入水，煎煮后进行过滤、浓缩、醇沉后得到沉淀物，随后将所述沉淀物进行溶解，得到中药提取液；

(3)向所述中药提取液中加入重楼皂苷、草珊瑚碱、大蓟提取物、八月札提取物、黄芩苷、甘草酸、厚朴酚、长春新碱，混合均匀，调整碳氮比，得到调整后提取液；

(4)将所述调整后提取液分别制备为培养基1和培养基2；

(5)取重楼、草珊瑚、大蓟、八月札、黄芩、甘草、厚朴、蒲公英、石见穿、仙鹤草、贯叶连翘和牛蒡子各中药植物的茎和叶依次进行消毒、清洗、裁剪，得到待培养物质，将所述待培养物质放入所述培养基中1培养得到培养产物A；

(6)将苦白蹄、裂蹄木层孔菌、东方栓菌依次进行消毒、清洗、裁剪后放入步骤(4)所述培养基2中培养得到培养产物B；

(7)将所述培养产物A和培养产物B分别经摇床扩繁、药效筛选后混合均匀，得到所述靶向抑制肺癌及其干细胞增殖、转移的活性组合物。

2.根据权利要求1所述的靶向抑制肺癌及其干细胞增殖、转移的活性组合物的制法，其特征在于，步骤(1)、(3)和(6)中，所述各原料的配比为重楼皂苷6％、草珊瑚碱6％、大蓟提取物5％、八月札提取物5％、黄芩苷7％、甘草酸5％、厚朴酚5％、长春新碱7％、苦白蹄8％、裂蹄木层孔菌8％、东方栓菌8％、蒲公英6％、石见穿5％、仙鹤草7％、贯叶连翘6％、牛蒡子6％。

3.根据权利要求1所述的靶向抑制肺癌及其干细胞增殖、转移的活性组合物的制法，其特征在于，步骤(1)中，所述各原料粉碎至150目-250目。

4.根据权利要求1所述的靶向抑制肺癌及其干细胞增殖、转移的活性组合物的制法，其特征在于，步骤(2)中，粉碎原料与水的质量比为1:(8-12)；

所述煎煮为文火煎煮，所述煎煮时间为1.5-2.5h；

所述浓缩为加热浓缩，所述加热时间为1-2h；

利用浓度为85％-95％乙醇溶液对所述浓缩液体醇沉2-3小时，乙醇是浓缩液体质量的5-10倍；

利用反渗透水将沉淀物进行溶解，所述反渗透水是沉淀物质量的5-7倍。

5.根据权利要求1所述的靶向抑制肺癌及其干细胞增殖、转移的活性组合物的制法，其特征在于，步骤(3)中，使用硫酸铵和葡萄糖将所述中药提取液的碳氮比调整至(25-29):1。

6.根据权利要求1所述的靶向抑制肺癌及其干细胞增殖、转移的活性组合物的制法，其特征在于，步骤(4)中，所述培养基1的组分组成为：调整后提取液96.248％-96.948％、葡萄糖1.2％、磷酸氢二钾0.3％、硫酸镁0.15％、酵母膏0.1％、维生素B₁0.01‰、维生素B₆0.01‰、琼脂1.3％-2％；

所述培养基2的组分由加富PDA培养基组成：土豆20％、葡萄糖2％、酵母膏1％、蛋白胨1％、磷酸二氢钾0.3％、硫磺镁0.15％。

7.根据权利要求1所述的靶向抑制肺癌及其干细胞增殖、转移的活性组合物的制法，其特征在于，步骤(5)中，所述茎和叶的重量为各原料中药成分配比的0.5％-1.5％。

8.根据权利要求1所述的靶向抑制肺癌及其干细胞增殖、转移的活性组合物的制法，其特征在于，步骤(5)和(6)中，所述消毒使用的是浓度为8％-12％的次氯酸钠，所述消毒的时间为8-12min；

将所述茎或叶裁剪至1cm×1cm；

所述培养温度为30-37℃，所述培养湿度为40％-50％，所述培养时间为5-7天。