[发明专利]一种耐盐促生菌菌株D5-2及其应用

说明书

本发明涉及一种耐盐促生菌菌株D5‑2，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2019年5月5日，保藏号为CGMCC NO.17706，所述耐盐促生菌菌株D5‑2的16S rDNA核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。接种菌株D5‑2能在盐胁迫下显著提高番茄的耐盐促生能力，将该菌株制成菌剂，然后注入番茄幼苗根围土壤中，能明显增大番茄的株型、株高和茎粗，显著促进番茄幼苗的干物质积累，并对番茄幼苗的根长、表面积、根体积、根尖数的均有促进作用，减缓了盐害现象，从而促进番茄幼苗的生长，有助于提高番茄的耐盐性。

技术领域

本发明涉及一种耐盐促生菌菌株D5-2及其应用，属于微生物技术领域。

背景技术

番茄(Solanum lycopersicum)是世界上种植量仅次于马铃薯的最多的茄科蔬菜作物，也是肉果及茄科的重要模式植物(Salvalaggio等,2017；张天鹏和杨兴洪,2018)，深受大众喜爱和欢迎，目前世界范围内报道 的番茄品种已超过3000 种，全球番茄生产正面临生物和非生物胁迫的严峻挑战。盐渍是农业中抑制作物生长和降低粮食产量以限制全球主要粮食作物生产力的一大主要环境胁迫 (Kaushal等,2016；栗露露等,2019)。番茄对盐中度敏感，主要种植在世界温暖和干旱地区，而这些地区的土壤往往盐度比较高。随着可利用淡水资源的日益缺乏、人口的急剧膨胀和自然资源的不合理使用，利用盐度高的旱区、半干旱地区和沿海地区土壤发展农业生产不得不为之(TankSaraf,2018)。近年来国内外番茄设施农业的迅猛发展使得番茄面临次生盐渍等各类胁迫的问题更为突出，因此番茄耐盐性及其调控研究就显得格外重要。

Kloepper和Schroth于1978年首次定义植物根际促生菌(PGPR)为定植于植物根部的有益土壤细菌。PGPR参与了土壤生态系统的各项生物活动，通过提高营养的可利用性(固氮解磷等)、提高激素产量、竞争有害的微生物、共生关系的促进等等，使其具有动态的营养转换和可持续的作物生产(Paul等,2005；艾文琴等,2018)。诸多研究表明，与根相关的多种微生物对促进植物盐渍适应至起到关重要的作用。PGPR通过生产生长素(IAA)、赤霉素(GAs)和一些未知的因子，会导致根长、根表面积和根尖数量的增加，从而促进养分的吸收，从而改善植物在胁迫条件下的健康状况。利用这些微生物本身可以减轻盐土农业方面的压力，并促进可持续农业的良性发展。

目前，有关PGPR改善盐土、促进植物耐盐性的研究工作尚处于起步阶段，主要集中在假单胞菌属(Pseudomonas spp.)、芽胞杆菌属(Bacillus spp.) 等，并对它们在调整植物内源激素平衡、离子稳态、抗氧化和光合作用等方面做了一些机理性的探讨。而关于番茄耐盐的根际促生菌的介绍很少。

发明内容

本发明的目的在于解决上述现有技术的不足，提供一种耐盐促生菌菌株 D5-2及其应用。

技术方案

本发明筛选到一种耐盐促生菌菌株D5-2，分类命名为Bacillus siamensis KCTC13613，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（北京市朝阳区北辰西路1号院3号），保藏日期为 2019年5月5日，保藏号为CGMCC NO.17706。

所述耐盐促生菌菌株D5-2的16S rDNA核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

所述耐盐促生菌菌株D5-2分离自张家港松花菜根际土壤，称取张家港松花菜根际土壤样本(连带植物根系)后，加入双蒸水制备土壤悬液，将土壤悬液转接于含2％NaCl的LB液体培养基内，30℃振荡培养24h后，以1:100的接种量，再次转接于4％NaCl含量的LB培养基中，30℃振荡培养24h后，再转接于6％NaCl 含量的LB培养基中，30℃振荡培养24h后，将所得细菌培养液10⁶稀释涂布，挑取生长良好的单菌落，即为耐盐促生菌菌株D5-2。

上述耐盐促生菌菌株D5-2在盐胁迫中促进番茄生长的应用。