[发明专利]一种鉴别萝卜肉质根红肉色的分子标记

说明书

本发明公开了一种鉴别萝卜肉质根红肉色的分子标记，所述分子标记是基于RsMYB1基因的启动子区域的InDel位点差异开发的分子标记：正向引物：5’‑GCGAGGAAAAGGTAGGTAGC‑3’；反向引物：5’‑CAAAACCACGTAAAGCTTGCA‑3’。本发明还公开了一种分子鉴别萝卜肉质根红肉色的方法：以待鉴别萝卜品种或分离世代植株的基因组DNA为模板，利用所述的分子标记进行鉴定。本发明一方面为了开发分子标记用于萝卜肉质根红肉性状的分子辅助选择育种，提高复杂性状的遗传改良效率；另一方面为解决传统根肉色鉴定方法将肉质根切开观察，导致受损种根贮藏困难、成活率低的难题。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种鉴别萝卜肉质根红肉色的分子标记。

背景技术

萝卜（Raphanus sativus L.，2n=2x=18）又名莱菔、芦菔，是十字花科萝卜属重要的蔬菜作物，具有较高的营养价值和药用食疗价值。我国是全球萝卜生产第一大国，国内种植面积位居各类蔬菜作物前3名（中国农业年鉴编辑委员会，2007）。萝卜种质资源丰富，栽培历史悠久，经过长期自然和人工选择，形成了不同皮、肉色的类型和品种。红皮和/或红肉萝卜因其色泽鲜艳、营养价值高而被广大消费者所偏爱。

（1）花青素是我国特有萝卜‘心里美’红色根肉的呈色色素，对植物生长发育和人类健康均有重要意义

花青素是由花青素苷元（请参见图1）衍生而来的一类水溶性植物色素，赋予植物多彩的颜色（Koes et al.，2005），对植物生长和人类健康有重要意义。有助于植物吸引昆虫授粉和传播种子，预防紫外辐射损伤，抵御病原菌侵染（Holton Cornish，1995；孙建霞等，2009）；还具有抗氧化，预防癌症、炎症和心血管疾病等功能（He Giusti，2010）。目前在自然界中分离鉴定的600多种花青素主要由6种花青素苷元衍生而来，分布比例为：矢车菊素苷元50%、飞燕草素苷元12%、天竺葵素苷元12%、芍药花素苷元12%、矮牵牛素苷元7%和锦葵素苷元7%（Kong et al.，2003；戴思兰 洪艳，2016；图1）。

‘心里美’类型萝卜为我国特有的红色根肉品种资源（请参见图2），其根肉红色是因花青素的大量特异积累（Park et al.，2011；Lim et al.，2016）。十字花科蔬菜如芥菜、大白菜、红菜薹、结球甘蓝所含花青素均以矢车菊素苷元为主（张淑江 等，2014），但萝卜以天竺葵色素为主（Park et al.，2011）。红肉萝卜富含花青素、色泽鲜艳、营养保健价值高，为消费者喜爱。萝卜源花青素稳定性高、特性与人工色素Food Red No. 40类似，已被用作天然食用色素（Rodriguez-Saona et al.，1999；He Giusti，2010）。随着人们生活水平的提高和健康保健意识的增强，市场对富含花青素萝卜品种和天然花青素产品的需求将显著上升。富含花青素的‘心里美’可作为花青素的“天然生物反应器”和萝卜根肉色遗传改良优异基因的供体。

（2）萝卜根肉色性状遗传复杂，转育困难，其花青素合成调控机制不明确，导致萝卜肉色遗传改良进展缓慢