[发明专利]垂丝海棠花多糖在制备免疫增强药物方面的应用

说明书

本发明公开了一种在制备免疫增强药物方面的应用。本发明使用环磷酰胺建立小鼠免疫力低下模型，测定小鼠脾脏指数、胸腺指数、炭粒廓清能力、血清溶血素含量、脾淋巴细胞增殖能力、小鼠血清及脾组织中LDH和ACP的含量、细胞因子（IL‑2、IL‑6、TNF‑α、IFN‑γ）的含量及mRNA表达、小鼠血清及脾组织中的氧化指标等，试验结果表明：垂丝海棠花多糖可有效改善环磷酰胺引起的免疫抑制和氧化应激，增强小鼠免疫能力；说明垂丝海棠花多糖可以增强小鼠免疫力，用作制备免疫增强药物。

技术领域

本发明属于多糖药物技术领域，具体涉及一种垂丝海棠花多糖在制备免疫增强药物方面的应用。

背景技术

垂丝海棠(Malus halliana Koehne)为蔷薇科苹果属落叶乔木，别名海棠、垂枝海棠，是中国的特有植物。分布于四川、安徽、陕西、浙江和云南等地，主要为观赏植物栽培，有重瓣、白花等变种。其味淡、苦，性平，入肝经，具有调经和血的功效，主治血崩。药理研究表明，垂丝海棠花具有保肝、抗氧化、体外α-葡萄糖苷酶抑制、体外抗凝血等生物活性。如，中国专利申请CN201710333531.6公开了一种垂丝海棠花多糖、提取方法及其在制备促凝血药物方面的应用；专利申请CN201810039139.5公开了一种垂丝海棠花多糖及其提取方法和在制备治疗功能性便秘药物方面的应用。

垂丝海棠花的化学研究主要集中在黄酮类化合物。多糖作为生物大分子目前已发现在免疫调节和免疫系统衡态维持等方面发挥着重要的作用。但是，目前未见有关垂丝海棠花多糖的体内活性研究。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术缺陷，提供一种垂丝海棠花多糖在制备免疫增强药物方面的应用，其治疗效果显著，且无毒副作用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供了一种垂丝海棠花多糖在制备免疫增强药物方面的应用。

上述垂丝海棠花多糖在制备免疫增强药物方面的应用，具体的，垂丝海棠花多糖的适宜用量为16-50mg/kg。

具体的，上述垂丝海棠花多糖经下述步骤制备获得：将干燥的垂丝海棠花用石油醚加热回流，然后取残渣用乙醇浸泡，浸泡结束后取出残渣并加水煎煮，煎煮结束后过滤，滤液加95％乙醇至终浓度为70―85％，静置，取沉淀物，分别用无水乙醇、丙酮、石油醚淋洗，淋洗后所得沉淀即为垂丝海棠花多糖。

进一步优选的，上述垂丝海棠花多糖经下述步骤制备获得：将干燥的垂丝海棠花用石油醚加热回流2―4次，每次加热回流时间为1―4h；然后取残渣用60―80％乙醇浸泡2―4次，每次浸泡24±12h；浸泡结束后取出残渣并加水煎煮2―4次，每次煎煮2―4h，煎煮结束后过滤，合并滤液并加入95％乙醇至终浓度为70―85％，静置，取沉淀物，分别用无水乙醇、丙酮、石油醚淋洗，用水复溶，复溶液浓缩后经冷冻干燥即得垂丝海棠花多糖。

环磷酰胺为常用抗肿瘤药物，对多种肿瘤均有一定治疗作用。环磷酰胺无体外活性，主要通过肝脏P450酶水解进而发挥作用，其可引起免疫抑制和氧化应激反应。免疫功能较为复杂，涉及机体各个方面，所以关于免疫功能的影响需涉及多个方面。垂丝海棠花多糖是否同时具有免疫调节的作用，值得研究。本发明使用环磷酰胺腹腔注射建立小鼠免疫低下模型，研究了垂丝海棠花多糖增强免疫力方面的作用。

本发明利用垂丝海棠花多糖给予小鼠灌胃600mg/(kg·d)、400mg/(kg·d)、200mg/(kg·d)，注射环磷酰胺80mg/(kg·d)，建立小鼠免疫抑制模型，了解小鼠免疫情况。本发明测定了小鼠脾脏指数、胸腺指数、炭粒廓清能力、血清溶血素含量、脾淋巴细胞增殖能力，同时测定小鼠血清及脾组织中LDH和ACP的含量；同时测定了细胞因子(IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ)的含量及mRNA表达，以及小鼠血清及脾组织中的氧化指标。经试验发现：垂丝海棠花多糖能够增强小鼠的免疫力，具有较好的免疫增强功效，可用于制备免疫增强药物。