[发明专利]CoQ10在抗矽肺纤维化中的应用

说明书

本发明公开了CoQ₁₀在抗矽肺纤维化中的应用，其特征在于，包括以下步骤：(1)设置对照组：选取SPF级6周龄雄性C57小鼠24只，体重20±2g，先适应性饲养一周后随机分为对照组、模型组、治疗组；模型组、治疗组采用气管内一次性滴注0.1mL SiO₂悬液构建小鼠矽肺模型，对照组同法滴注等体积生理盐水；治疗组术后48h后每日给予0.1mL CoQ₁₀，灌胃，对照组、模型组自主进食。本发明具有如下优点：CoQ₁₀降低SiO₂诱导的矽肺纤维化，CoQ₁₀能够下调胶原蛋白、羟脯氨酸及α‑SMA表达，其作用机制可能是反馈性调节内源性HMGCR表达，影响氧化呼吸链，为后续矽肺治疗的机制的研究提供了新视角。

技术领域

本发明涉及医学工程技术领域，具体是指一种CoQ₁₀在抗矽肺纤维化中的应用。

背景技术

目前，我国累计报告尘肺病超过85万余例，其中矽肺占比50％以上。其特征表现为SiO₂颗粒被吸入肺内，刺激肺组织启动自我修复机制，激活成纤维细胞产生胶原纤维。然而，当肺组织受到反复或过度刺激时，成纤维细胞异常增殖并分泌大量胶原纤维，导致肺间质胶原过度沉积，并使肺间质增厚出现纤维化。临床治疗主要集中于支气管肺泡灌洗术合并抗纤维化与并发症对症治疗，同时给予氧疗、心理辅导等综合治疗策略，但并无特效治疗方案，因此，是否能在现有药物宝库中挖掘更安全、更方便、同时兼得预防和治疗等多方面优势的新药，对于减轻患者症状，减轻社会负担具有重要意义。

CoQ₁₀由于具有抗氧化，抗纤维化，清除自由基，扩张血管，抗炎等作用，广泛用于降低血液粘度，改善冠状动脉血运重建缺血和再灌注损伤。研究发现CoQ₁₀能够通过抑制TGFβ-1表达并抑制肝纤维化,同时CoQ₁₀还能够缓解精氨酸诱导的胰腺纤维化，降低胰腺组织胶原沉积。

发明内容

为解决上述关键问题，本发明提供的技术方案为CoQ₁₀在抗矽肺纤维化中的应用，其特征在于，包括以下步骤：

(1)设置参照组：选取SPF级6周龄雄性C57小鼠24只，体重20±2g，先适应性饲养一周后随机分为对照组、模型组、治疗组；模型组、治疗组采用气管内一次性滴注0.1mL SiO₂悬液构建小鼠矽肺模型，对照组同法滴注等体积生理盐水；治疗组术后48h后按照每日给予0.1mL CoQ₁₀(0.2mg/mL)，灌胃，对照组、模型组自主进食；

(2)制备矽肺模型：将小鼠异氟烷麻醉后，暴露气管，分别于对照组滴注0.1mL生理盐水、模型组和治疗组分别气管内滴注0.1mL SiO₂悬液，然后缝合皮肤，观察小鼠生存状态；治疗组术后48h，每只小鼠每日给予0.1mL CoQ₁₀灌胃；60天后，用0.3mL0.3％乌拉坦腹腔注射麻醉处死小鼠，取右肺中叶，再用生理盐水冲洗后用4％多聚甲醛固定，其余肺组织置于-80℃冰箱冻存；

(3)HE染色及天狼星红染色：小鼠肺组织用4％多聚甲醛固定右肺中叶48h后，脱水，包埋，切片，切片厚度为8μm，在56℃条件下烤片6h后进行HE染色及天狼星红染色；

(4)羟脯氨酸测定：用天平准确称取50mg冻存的小鼠肺组织，冰上剪碎，加入1mL水解液，在96℃条件下水浴，充分水解20min，流水冷却后，调节各管PH在6.0-6.8，加双蒸水至10mL混匀，加入适量活性炭，在3500rpm条件下离心10min，取上清1mL做检测；分别设空白管，标准管及检测管，依次滴加一、二、三号试剂，混匀后在60℃条件下水浴15min，冷却后在3500rpm条件下离心10min，取200μL上清于96孔板，利用酶标仪在波长550nm处检测各管吸光度值，计算各组小鼠肺组织羟脯氨酸含量，并进行统计分析；