[发明专利]木兰脂素及对DDIT3基因的调控在防治动脉粥样硬化中的应用

说明书

本发明公开了一种木兰脂素在治疗动脉粥样硬化药物中的应用，以及对DDIT3基因的调控在防治动脉粥样硬化中的应用，涉及木兰脂素对棕榈酸致血管内皮细胞损伤的改善作用，并探讨其作用机制。本发明采用HUVEC进行实验，通过MTT法测定木兰脂素对棕榈酸处理的HUVEC血管内皮细胞活性的影响，并提取细胞总RNA，用Affymetrix U4302.0基因芯片进行标记杂交实验，RMA法对Affyemtrix基因芯片的扫描结果进行分析，筛选出差异基因，随后采用实时定量荧光PCR法对表达的差异基因进行验证。本发明结果证实，木兰脂素能下调DDIT3基因表达，对棕榈酸损伤的血管内皮细胞具有明显的保护作用。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种木兰脂素单体，木兰脂素在制备预防或治疗动脉粥样硬化药物和保健食品中的用途；同时涉及木兰脂素对DDIT3基因的调控在防治动脉粥样硬化中的应用。

背景技术

动脉粥样硬化是一种多因素的动脉疾病。其特征是动脉壁增厚，动脉管腔变窄，最终导致供血不足和缺血。这些疾病在主要器官中最为突出，在这些器官中，血液供应对正常功能至关重要。例如，冠状动脉很容易发生动脉粥样硬化。冠状动脉管腔狭窄或阻塞会导致心肌梗塞，导致心脏病发作。在高风险人群中，大脑中动脉容易发生动脉粥样硬化，导致中风。动脉管腔直径的减小限制了血液的通过量，从而在心输出量保持正常的情况下增加了对血流的阻力，导致血压升高，这是高血压的一个原因。

动脉粥样硬化是心血管疾病的主要形式。根据世界卫生组织（世卫组织）的一份报告，动脉粥样硬化疾病，包括缺血性心脏病和脑血管病，在心血管疾病中占很大比例的死亡率。2014年，42%的心血管死亡是由心脏病发作引起的，36%是由中风引起的。心血管疾病的各种形式是本世纪疾病的主要负担。在过去的十年里，心血管疾病一直是全世界死亡的主要原因，其次是传染病和癌症。2014年，心血管疾病共造成1730万人死亡，约占全世界死亡人数的31.5%。预计到2030年，心血管疾病死亡人数将增至2300万。世卫组织关于死亡原因的详细分类报告表明，缺血性心脏病和脑血管病是全世界死亡的主要原因。前者占总死亡人数的12.2%，后者占总死亡人数的9.7%。据估计，这种趋势可能会持续到2030年。在香港，过去十年中，缺血性心脏病和脑血管疾病分别是癌症的第二个和第四个主要死亡原因。由于世界面临如此严峻的疾病形势，迫切需要寻求更好的心血管疾病（如动脉粥样硬化）的预防和治疗方法。

近年来越来越多的研究证实，内质网应激与动脉粥样硬化的发生发展密切相关。已知的一些心血管疾病的独立危险因子，如同型半胱氨酸、肥胖和细胞内游离胆固醇的积聚均能引发内质网应激（ERS），而内质网应激则可能通过增加细胞内脂质的积聚，激活炎症反应通路和诱导细胞凋亡而促进动脉粥样硬化的发生发展。内质网应激反应通路的激活可能是动脉粥样硬化病理过程中的共同发病机制，而内质网应激反应通路中的关键因子也可能成为动脉粥样硬化治疗的新靶点。

激活转录因子（activating transcription factor 3，DDIT3）是亮氨酸拉链结构的活化转录因子，属于cAMP反应原件结合（cAMP-responsive element-binding，CREB）转录因子家族之一，通过其碱性亮氨酸拉链结构域与ATF/CREB 顺式作用元件结合调控基因表达。研究表明 DDIT3是一种应激反应基因，可被一系列细胞应激信号诱导，如DNA 损伤、氧化应激、细胞损伤以及内质网应激。是联系内质网应激与细胞凋亡的重要中间信号分子。内质网应激反应诱导DDIT3基因的表达，可引发内皮细胞凋亡而致内皮功能损伤，引发血管内皮细胞和血管平滑肌的凋亡致细胞残骸沉积在血管，从而促进动脉粥样硬化的发生发展。ERS被认为是多种疾病的病理机制，特别与动脉粥样硬化性疾病密切相关。ERS不仅能影响粥样硬化的危险因素，并且能从血管壁层面影响细胞生物过程。特别是ERS既能够引起巨噬细胞凋亡也有可能引起内皮细胞凋亡。