[发明专利]一种提高酵母菌株空间诱变效率的方法在审
申请号: | 201910435220.X | 申请日: | 2019-05-23 |
公开(公告)号: | CN110129309A | 公开(公告)日: | 2019-08-16 |
发明(设计)人: | 叶明强;邝哲师;周鹏飞;黄静;潘木水;丘银清 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 |
主分类号: | C12N13/00 | 分类号: | C12N13/00;C12N1/18;C12R1/865 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 510610 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 诱变 空间诱变 活化菌种 酵母菌株 优质菌株 种子菌株 筛选 备选 活化 接种 固体培养基 筛选培养基 斜面培养基 种子培养基 出发菌种 菌体接种 菌株接种 摇床培养 菌体 菌液 菌株 发酵 突变 太空 | ||
1.一种提高酵母菌株空间诱变效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)菌株的培养
从原始出发菌种中挑取1-2环菌体,接种到种子培养基中,在28-33℃温度下,150-170rpm,摇床培养16-22小时,作为备选菌株待用;
(2)菌株的筛选
将步骤(1)中的备选菌株接种于筛选培养基上摇床培养发酵,最终选出OD600=0.7-0.9的菌株,作为种子菌株;
(3)活化
将步骤(2)中的种子菌株接种1-2环菌液至斜面培养基上,在温度为26-28℃的条件下培养18-22小时,停止培养,作为活化菌种;
(4)样品准备
将步骤(3)中活化菌种挑取1-2环菌体接种至固体培养基上,将接完种的斜面放入培养箱中,25~35℃条件下进行培养3-7小时,在无菌条件下,刮取一块培养好的斜面加入2mL搭载小管中,用封口膜封口,置于4℃温度下保存;
(5)空间诱变
将样品送往太空搭载,太空搭载时间为15-19天,辐射剂量0.1-0.9mGy,诱变后进行突变率分析及活性分析。
2.根据权利要求1所述的一种提高酵母菌株空间诱变效率的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述种子培养基按质量百分比计,其原料组成包括:葡萄糖0.5-1.0%、乳糖0.3-0.5%、甘油0.3-0.5%、蛋白胨0.5-1.0%、酵母膏0.5-1.0%,加无菌蒸馏水至100%。
3.根据权利要求1所述的一种提高酵母菌株空间诱变效率的方法,其特征在于:步骤(2)中,所述筛选培养基按质量百分比计,其原料组成包括:酵母膏0.5-1.0%、蛋白胨1-2%、葡萄糖1-2%、酵母代谢物0.5-1.0%,加无菌蒸馏水至100%。
4.根据权利要求3所述的一种提高酵母菌株空间诱变效率的方法,其特征在于:所述酵母代谢物为乙酸乙酯、庚酸乙酯、乙酸、丁酸和己酸中的一种或几种。
5.根据权利要求1所述的一种提高酵母菌株空间诱变效率的方法,其特征在于:步骤(3)中斜面培养基按质量百分比计,其原料组成包括:玉米浆0.3-0.5%、葡萄糖0.5-1.0%、蛋白胨0.3-0.5%、酵母膏0.5-1.0%、琼脂粉1.4-1.8%,加无菌蒸馏水至100%,并在自然PH下经过120-125℃湿热灭菌25min。
6.根据权利要求1所述的一种提高酵母菌株空间诱变效率的方法,其特征在于:步骤(4)中,所述固体培养基按质量百分比计,其原料组成包括:葡萄糖1-2%,蛋白胨1-2%,酵母浸出粉0.5-1%,琼脂1.5-2.0%,加无菌蒸馏水至100%。
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