[发明专利]一种茶多酚中EGCG含量的快速检测方法

说明书

本发明属于分析化学领域，尤其涉及超高效液相色谱快速检测技术，具体是一种以茶多酚为原料，利用超高效液相色谱检测技术，高效快速检测茶多酚中EGCG含量的方法，采用C₁₈色谱柱，以一定比例的水‑冰醋酸‑甲醇为流动相，通过梯度洗脱的方式，实现茶多酚中EGCG含量的快速检测，该色谱条件下EGCG的理论塔板数大于16000，分离度大于3。采用本检测方法，使较难分离的EGCG、EC和咖啡因得到有效分离，且检测时间短，灵敏度高，重现性好，高效快捷，可用于EGCG的含量检测和质量控制。

技术领域

本发明属于分析化学领域，尤其涉及超高效液相色谱快速检测技术，具体是一种以茶多酚为原料，利用超高效液相色谱检测技术，高效快速检测EGCG含量的方法。

背景技术

茶多酚（tea polyenohs，Tp）主要由儿茶素、黄酮、酚酸、花色素4大类物质组成。而儿茶素（catechins）占茶多酚总量的 60%～80%。现代研究表明，儿茶素既是理想的天然抗氧化剂，又是一类极有价值的天然药物原料，它具有抗肿瘤、降血压、降血脂、抗氧化、抗衰老以及抑菌、抗艾滋病病毒等功效。茶多酚中儿茶素类单体化合物主要有表儿茶素（EC）、表没食子儿茶素（EGC）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）、没食子儿茶素没食子酸酯（GCG）和表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）等，其中最具生物活性的是EGCG。

近年来，世界发达国家积极推进儿茶素产品的开发应用，以其作为天然抗氧化剂和自由基清除剂，已广泛应用于食品加工、医药保健和日用化工等领域，尤其是FDA确认儿茶素具有药效功能后，国际市场对其需求量日增。研究各种儿茶素的药理活性和协同作用以及其在体内的代谢情况，开发儿茶素类新药，均需大量高纯度的各类儿茶素单体。尤其是酯型儿茶素EGCG，其功效远远大于其他儿茶素组分，已成为临床应用研究的焦点。

检索到有关茶多酚中EGCG含量的检测方法文献如下：

1、“高效液相色谱法测定茶多酚中EGCG和RECG的含量”，刘锦文等，《食品工业科技》，2010年第11期，摘要：建立茶多酚中表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）和表儿茶素没食子酸酯（ECG）的高效液相色谱含量测定方法。方法：以Diamonsil C₁₈（4.6mm×200mm，5μm）为色谱柱，流动相为甲醇-0.1％磷酸水溶液（68:32），流速为1.0mL/min，检测波长为279nm，柱温25℃，进样量为20μL。结果：EGCG的进样量在0.1-6μg范围内，ECG的进样量在0.05-1.2μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。平均加样回收率分别为EGCG：97.57％、ECG：96.60％，RSD分别为EGCG：1.93％、ECG：1.53％。结论：本方法简便，准确，重复性好，可作为茶多酚中EGCG和ECG的含量测定方法。

2、“反相高效液相色谱法测定茶多酚中表没食子儿茶素没食子酸酯的含量”，王菊萍等，第16卷第15期，2006年8月，摘要：采用反相高效液相色谱法测定茶多酚中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的含量。方法以甲醇：水：乙酸=26:73.5:0.5(体积比)为流动相(1.0mL／min)，C₁₈柱(250.0mm × 4.6 mm，5μm)，UV检测器(278nm)。结果EGCG在0.1503-0.6517mg／mL范围内线性关系良好(r=0.9995)，平均回收率为100.26％，RSD为0.86％。结论该法简便、快速，可作为测定茶多酚中EGCG含量的方法。