[发明专利]沙眼衣原体抗原检测方法及试剂盒

说明书

本发明提供一种沙眼衣原体抗原检测方法，将胶体金标记的沙眼衣原体抗体载于固体硝酸纤维素膜上，并在所述固体硝酸纤维素膜上包被由抗衣原体脂多糖单克隆抗体‑II制成的检测线和由抗鼠、兔、羊IgG二抗形成的控制线；先将人体的分泌物与0.2 mol/L HCl溶液进行混合，然后再放入含有0.2 mol/L NaOH溶液的样品处理管中，滴于固体硝酸纤维素膜上，所述固体硝酸纤维素膜上同时显示出检测线和控制线双线时，该人体的分泌物中含有沙眼衣原体抗原；其中，所述分散剂由相同体积的0.2 mol/L NaOH溶液和0.2 mol/L HCl溶液组成。本发明所述提供的沙眼衣原体抗原检测方法为一步法，具体高度的特异性很少出现困扰临床的假阴性或假阳性等问题，具有高度的敏感性且操作简单，耗时短。

技术领域

本发明涉及免疫学技术领域，尤其涉及一种沙眼衣原体抗原检测方法及试剂盒。

背景技术

衣原体按其特性分为三类：沙眼衣原体（Chlamydia Trachomatis）、鹦鹉热衣原体（Chlamydia Psittas）和肺炎衣原体（Chlamydia Pneumoniac）。沙眼衣原体有15个已知的血清型，其中12个血清型与沙奶和生殖道的感染有关；另外3个则与性病性淋巴肉芽肿（Lymphor Ganuloma Venereun,LGV）的发生有关。

诊断男女病人衣原体感染的方法，目前常采用细胞培养法，具体操作时取女性子宫颈管或男性尿道的标本接种到单细胞层，然后进行48-72小时培养，对单细胞层进行染色，以观察有无典型的包涵体。如需提高细胞培养法的灵敏度，可将阴性培养物接种新鲜单层细胞，继续培养48-72小时后再观察，细胞培养法虽然灵敏度高，特异性强，但该方法工作量大，周期长，要求专门的设备和人员进行操作，实际临床应用受到一定限制。而最近建立的免疫荧光法和合成酶链反应、聚合酶链反应检测均要求掌握技巧的技术人员进行试验操作及试验结果判读，对人员技术水平要求较高，不方便结果的直接判读。

发明内容

由鉴于此，本发明确有必要提供一种沙眼衣原体抗原检测方法，以解决上述问题。

本发明所采用的技术方案是：一种沙眼衣原体抗原检测方法，具体步骤包括：将胶体金标记的沙眼衣原体抗体载于固体硝酸纤维素膜上，并在所述固体硝酸纤维素膜上包被由抗衣原体脂多糖单克隆抗体-II制成的检测线和由抗鼠、兔、羊IgG二抗形成的控制线；

先将人体的分泌物与0.2 mol/L HCl溶液进行混合，然后再放入含有0.2 mol/L NaOH溶液的样品处理管中，滴于固体硝酸纤维素膜上，所述固体硝酸纤维素膜上同时显示出检测线和控制线双线时，该人体的分泌物中含有沙眼衣原体抗原；其中，所述分散剂由相同体积的0.2 mol/L NaOH溶液和0.2 mol/L HCl溶液组成。

本发明还提供一种用于沙眼衣原体抗原检测试剂盒，该试剂盒含有以下组分：

衣原体快速检测试剂卡、0.2 mol/L NaOH溶液、0.2 mol/L HCl溶液，其中，所述衣原体快速检测试剂卡包括固体硝酸纤维素膜和设置在所述固体硝酸纤维素膜上的加样端吸水层、检测层和吸水端吸水层，在所述检测层与所述吸水端吸水层之间设置有胶体金标记的沙眼衣原体抗体层，在所述检测层上包被有检测线和控制线。

需要说明的是：

胶体金免疫层析法将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂(抗体或单克隆抗体)吸附在结合垫上，当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后，通过毛细作用向前移动，溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，当移动至固定的抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，可通过肉眼观察到显色结果。