[发明专利]一种短尾大肠杆菌噬菌体及其应用

说明书

本发明涉及一种大肠杆菌噬菌体及其应用，特别涉及一种短尾强裂解性大肠杆菌噬菌体。上述大肠杆菌噬菌体命名为PD38，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2018年9月26日，保藏编号为CGMCC No.16391。该噬菌体对大肠杆菌具有较好的裂解作用，对食品、养殖环境中的大肠杆菌具有良好的消杀作用，同时可以防治鸡大肠杆菌引起的疾病。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种短尾大肠杆菌强裂解性噬菌体及其在食品杀菌、空间环境以及禽畜大肠杆菌腹泻疾病中的应用。

背景技术

大肠杆菌属于条件致病菌，致病力的强弱与大肠杆菌的血清型有关，不同动物之间也存在着差异性。鸡一旦感染大肠杆菌会引起死亡率急剧上升，引起腹泻，明显影响鸡的增重，而且还会影响蛋鸡产蛋率。鸡大肠杆菌病的主要传染源是病鸡和携带大肠杆菌的健康鸡，鸡群自身也可以通过粪便，分泌的粘液等传染给其它的健康鸡造成大面积感染，其中养殖环境中的大肠杆菌残留会造成鸡群持续发病，近几年该病一直困扰着养殖户，给养殖业带来很大的影响。

在我国，由于抗生素的普及和滥用，导致我国细菌的耐药性产生的非常普遍，大肠杆菌普遍出现交叉多重的耐药性，使得大肠杆菌病越来越难以防治。大剂量、大面积和高频率的使用抗生素，使得养殖成本不断增加，细菌的耐药性越来越严重，给养殖业的蓬勃发展造成了巨大的阻力。

烈性噬菌体，是一种可以杀死细菌的病毒。为应对细菌的耐药性，噬菌体作为细菌的天敌重新回到人们的视野。噬菌体繁殖速度比宿主菌快，在裂解周期内呈指数倍数增长繁殖，并且可随宿主菌增殖而不断的增殖。研究表明噬菌体能特异性的结合到宿主细菌表面的受体上，从而使宿主菌的耐药性突变减弱，并使其突变频率降低，从而减轻由于抗生素滥用所造成的机体菌群失调，降低耐药性的产生概率。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种短尾大肠杆菌强裂解性噬菌体。

本发明的另一目的是：针对目前养殖业中大肠杆菌导致的腹泻疾病、以及空间环境消毒和畜禽食品消毒提供一种有效防治的产品，本发明提供一种短尾强裂解性大肠杆菌噬菌体，开发一种对大肠杆菌具有强裂解性的噬菌体制剂，该制剂可以单独或鸡尾酒使用。为大肠杆菌感染的治疗、空间环境和畜禽产品消毒提供一种安全、无毒副及无残留作用的噬菌体产品，为工业化生产噬菌体制剂提供噬菌体来源。

本发明的又一目的是：提供一种无污染、无残留的环保有效的防治手段，将所述的噬菌体PD38制备成液体、冻干粉，单独或配合其他噬菌体，经口服、喷雾等方式，用于杀灭动物体内外、养殖空间环境中的大肠杆菌。

本发明的目的是这样实现的：一种短尾大肠杆菌强裂解性噬菌体，其特征在于：保藏号为：CGMCC No.16391，保藏单位为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2018年9月26日，该噬菌体命名为PD38。该噬菌体具有呈多面体的头部结构，头部直径约75nm，具有6个短尾丝；噬菌体在双层琼脂培养基平板上可以形成透亮空斑，周围无晕环，边缘清晰规则，直径约1～2mm；该噬菌体应属于短尾噬菌体科。

在本发明中：所述的噬菌体在40～50℃中放置60min，其活性稳定，在60℃中放置20min，效价降低约2个数量级，在70～80℃中放置20min则失活；在pH 为5～11时，活性稳定；在紫外线照射110min，几乎全部失活。

在所述的噬菌体的应用中，其特征在于：在感染大肠杆菌雏鸡中应用此噬菌体，2周内可以减少70％的死亡率。

在所述噬菌体的应用中，还可以用于养殖环境中粪便喷雾消毒抑制大肠杆菌增殖以及畜禽食品表面消毒。

在所述的噬菌体的应用中，其特征在于：将纯化后的噬菌体制备成液体、冻干粉形式，单独或与其他噬菌体、抗生素复配后通过口服或喷雾等途径用于大肠杆菌感染的控制。