[发明专利]一种检测脂滴极性的荧光探针

说明书

本发明提供一种检测细胞脂滴内极性的荧光探针，其化学结构式为：。该荧光探针在极性较小的癌细胞脂滴环境中会发出较强的荧光，而在极性较大的正常细胞脂滴环境中会发出较弱的荧光，因此能区分正常细胞与癌细胞，准确的定位于脂滴，具有较高的灵敏度，良好的光学稳定性以及对极性特异性响应，实现了对细胞内脂滴极性的检测。利用本发明的探针通过荧光成像技术可于评价和研究细胞中脂滴的含量，对研究获得细胞中脂滴的生理功能有潜在的应用价值。同时，该探针的合成步骤简单、纯化方便、收率高。

技术领域

本发明属于有机小分子荧光探针领域，具体涉及一种检测脂滴极性的荧光探针及其应用。

背景技术

脂滴由于其特殊的结构和生理功能，最近得到广大研究者的关注。脂滴作为富含脂质的亚细胞器，在真核细胞中广泛存在，由中性脂质的核心组成，所述中性脂质由安装相关蛋白质的单层磷脂包围。除了作为能量储存器外，脂滴还参与各种生理过程，包括细胞活化，迁移，增殖，凋亡等。越来越多的证据表明脂滴的异常与癌症发展有关。据报道，癌细胞中脂滴的数量高于正常细胞，因为脂滴提供的大量能量是癌细胞更快的增殖所必需的。因此，脂滴的数量可被视为癌症诊断的潜在肿瘤标志物。此外，由于癌细胞中脂质代谢的特定改变，癌细胞中脂滴的极性低于正常细胞。因此，结合两个指标（脂滴的数量和极性）将为癌症诊断提供更可靠和准确的信息。然而，就我们所知，通过监测脂滴的数量和极性变化来诊断癌症的研究尚未实现。

癌症是全世界公认的绝症之一，每年都有大量的人死于癌症。尽管癌症是重要的疾病，但是如果我们及时诊断与治疗，癌症死亡率是可以控制的。目前通过肿瘤标志物来诊断癌症已经为热点，尽管现有的一些肿瘤标记物已经大大提高了癌症诊断率，但是由于它们具有入侵性以及操作不方便等缺点而限制了它们的广泛应用。因此，发展新的肿瘤标记物对癌症的诊断与治疗具有十分重要的意义。近年来，脂滴因其独特的结构与性能广泛地引起大家的关注。脂滴除了为细胞提供能量以外，还与许多重要的生理活动有关。已经有报道称，由于脂滴的新陈代谢机理不同，所以脂滴在癌细胞中的极性会比在正常细胞中大。因此，脂滴的极性可以作为区分癌细胞与正常细胞的一个重要指标。所以，检测脂滴的极性将会为癌症的诊断提供重要的指导信息。

目前，荧光成像技术由于其高灵敏度、无创检测和高选择性，已成为检测生物微极性环境的有力工具。因此，发展一种新的极性探针检测细胞内脂滴的极性对于癌症的诊断和临床研究具有重要的意义。

发明内容

针对目前现有技术中存在的问题，本发明提供一种能检测脂滴内极性的荧光探针。该探针具有低毒性，良好的光学稳定性，能准确定位脂滴及对极性特异性响应，利用本发明的探针通过荧光成像技术检测癌细胞。

本发明的另一目的是提供一种上述荧光探针在检测细胞脂滴内极性的应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

一种检测细胞脂滴内极性的荧光探针，其化学结构式如式（I）所示：

式（I）。

上述荧光探针的制备方法，包括以下步骤：

（1）3-硝基-7-二乙胺基香豆素（1）与氯化锡于浓盐酸中搅拌反应，分离提纯得化合物3-氨基-7-二乙胺基香豆素（2）。

（2）3-氨基-7-二乙胺基香豆素（2）与对氟硝基苯于二甲基亚砜中加热反应后，加入氟化铯催化反应分离提纯得化合物3-（双4-硝基苯基）氨基-7-二乙基氨基香豆素（3），即荧光探针：

。

步骤（1）中，所述物料3-硝基-7-二乙胺基香豆素（1）与氯化锡的物质的量比为1:3。