[发明专利]一种利用佐夫色绿藻生产虾青素的方法在审
申请号: | 201910439206.7 | 申请日: | 2019-05-24 |
公开(公告)号: | CN110283867A | 公开(公告)日: | 2019-09-27 |
发明(设计)人: | 魏东;姜雪亚;陈俊辉 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学;广州藻能生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P23/00 | 分类号: | C12P23/00;C12R1/89 |
代理公司: | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人: | 张芬;张玲春 |
地址: | 510450 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 绿藻 虾青素 生产 接种 过氧化氢诱导 摇瓶培养基 混合碳源 生产效率 实验条件 醋酸钠 产率 摇瓶 发酵 光照 胁迫 诱导 放大 验证 细胞 | ||
1.一种利用佐夫色绿藻生产虾青素的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1,对佐夫色绿藻进行快速扩种提高细胞密度,并将其接种至摇瓶培养基进行胁迫诱导;混合碳源浓度中,醋酸钠浓度为0-3.0g/L,接种密度为0.24×108~1.22×108cfu/mL,光照强度80-320μmol.s-1.m-2,过氧化氢诱导剂浓度0-137.5mg/L;
S2,将步骤S1摇瓶获得诱导虾青素实验条件在光发酵罐中不同操作方式下进行效果验证。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤S1中,摇瓶两阶段培养诱导:快速扩种和虾青素的诱导;具体的,分别是:
第一阶段:低光强提高细胞密度作为种子液;
第二阶段:虾青素的诱导:将第一阶段种子液接入进行虾青素的诱导。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:步骤S1中,混合碳源组合方式为20-30g/L的葡萄糖和1.5-3.0g/L的醋酸钠。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:步骤S1中,摇瓶诱导阶段,将种子液接种至摇瓶培养基中进行诱导的接种密度为1.22×108cfu/mL。
5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:步骤S1中,摇瓶诱导阶段,光照强度为240μmol.s-1.m-2,过氧化氢诱导剂的添加范围为107.5-137.5mg/L。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤S2中,光发酵诱导验证:将步骤S1所述条件在光发酵罐进行效果验证,并在不同操作方式:恒定高光强、低光强-高光强、低光强-高光强-补加诱导剂进行佐夫色绿藻诱导。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述光发酵诱导验证是在恒定高光强条件下进行操作的具体步骤为:
5L的发酵罐装置采用外置光源,通过调节电流控制光照强度,调节电流至最大(光照强度为653μmol.m-2.s-1)并维持恒定培养佐夫色绿藻。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:步骤S2中,在光发酵罐中低光强-高光强的培养方式(312-653μmol.m-2s-1),并培养至72h进行过氧化氢诱导剂补料,补料浓度为107.5mg/L过氧化氢。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法,其特征在于:步骤S1和S2中,均采用完全无氮的Bristol培养基为基本培养基;接种密度为2.30g/L,其中培养基中葡萄糖浓度为30g/L、硝酸钠为碳源、碳氮比为34;在光照为10μmol.m-2.s-1、温度为26℃、转速为150r/min的恒温培养箱中培养。
10.权利要求1-8中任一项所述的利用佐夫色绿藻生产虾青素的方法制得的虾青素。
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