[发明专利]一种基于氧化石墨烯的细胞检测试剂盒、方法及应用

说明书

本公开属于细胞检测技术领域，具体涉及一种基于氧化石墨烯的细胞检测试剂盒、方法及应用。发明人研究团队发现氧化石墨烯‑胶体金复合物的光热效应应用于鼠伤寒沙门氏菌检测具有良好的检测灵敏度，但该技术需要使用价格较高的热成像仪，不利于推广应用。另一项应用红外感应式温度传感器对鼠伤寒沙门氏菌进行检测的研究中，所用胶体金的光热效应不如氧化石墨烯。本公开提供了一种基于氧化石墨烯光热效应对细胞数量进行检测的方法，通过激光发生器、温度传感器对试纸条上结合的氧化石墨烯进行检测，从而得到细胞的数量。检测需要的试剂主要为氧化石墨烯和抗体，成本经济，具有操作简便、检测灵敏的优点。

技术领域

本公开属于细胞检测技术领域，具体涉及一种基于氧化石墨烯的光热效应对细胞进行检测的试剂盒、检测方法及应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本公开的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

鼠伤寒沙门氏菌是一群非适应性具有广泛宿主的沙门氏菌，存在于动物肠道中，常温下可以迅速繁殖，是引起急性肠胃炎的主要病原菌之一。鼠伤寒沙门氏菌严重影响了人类的生命健康，对鼠伤寒沙门氏菌进行检测，具有重要的公共卫生意义。目前鼠伤寒沙门氏菌等食源性致病菌的检测方法有传统检测方法和快速检测方法。传统检测方法主要指平板计数法，该方法计数准确，但是一般需要增菌培养等步骤，操作繁琐，不利于现场检测。目前已建立的快速检测方法主要以免疫学检测方法为主，包括酶联免疫法，免疫传感器等，此类检测方法的灵敏度尚需进一步提高。

光热效应主要应用于癌症的光热治疗与生物成像等方面，将光热效应应用于建立检测方法的研究较少。Zhenpeng Qin等人利用胶体金的光热效应，建立了温度升高值与待测物浓度的标准曲线，利用光热效应对胶体金试纸条进行检测的灵敏度较目测灵敏度提高了32倍。氧化石墨烯具有较胶体金更优良的光热效应，发明人研究团队曾建立了一种基于氧化石墨烯-胶体金纳米复合材料光热效应的试纸条检测方法用于饮用水中鼠伤寒沙门氏菌的快速检测，检测灵敏度较目测方法提高了10倍。上述研究均采用价格较高的热像仪进行温度检测，发明人研究团队进一步采用价格低廉的红外感应温度传感器，建立了一种基于胶体金光热效应的沙门氏菌试纸条检测方法。

发明人认为，在之前的研究中，采用热像仪对氧化石墨烯-胶体金复合材料的光热效应进行检测不利于现场快速检测作业，并且热像仪价格较高($6000)。而且氧化石墨烯-胶体金复合材料制备过程较为复杂，工业化扩大生产有一定难度。而采用红外感应式温度传感器对胶体金试纸条进行检测的研究，由于胶体金的光热效应不够强，此方法的检测灵敏度可通过采用光热效应更强的新型纳米材料，如氧化石墨烯，得到进一步提高。

发明内容

针对上述研究背景，发明人认为可通过采用光热效应更强的新型纳米材料进一步提高温度传感器对试纸条进行检测的灵敏度。在此基础上，提供一种灵敏度更高、制备工艺更为简便的检测方法具有良好的工业推广意义，并且在本领域的公开研究中，将氧化石墨烯应用于细菌检测的研究较少。对此，本公开提供了一种基于氧化石墨烯光热效应的细胞数量检测方法。利用探头接触式温度传感器代替红外感应式温度传感器或热成像仪，对具有优良光热效应的氧化石墨烯在激光照射时产生的温度变化进行读数，显著降低了检测成本，所用装置具有结构简单、体积小、成本低、数据处理简便、检测结果灵敏且可靠等优点，可以实现对细菌、真菌等细胞的现场快速检测，有助于检测方法的推广应用。另外，本公开提供的检测技术仅依靠氧化石墨烯的光热效应进行定量，其检测精度可达到10⁴CFU·mL^-1，满足日常检测需要，且与采用氧化石墨烯-胶体金的检测方法效果相近；并且该检测方法所需的制备材料主要为氧化石墨烯、抗体及封闭液，大大降低了经济成本。

为了实现上述技术效果，本公开提供以下技术方案：

本公开第一方面，提供一种用于细胞检测的试纸条，所述试纸条为承载抗体的多孔纤维膜，所述抗体用于特异性识别并结合待测细胞。