[发明专利]一种用于检测目的抗原的免疫胶乳比浊法测定试剂盒

说明书

本申请提供一种用于检测目的抗原的免疫胶乳比浊法测定试剂盒，包括R1试剂、R2试剂，R1试剂包含促凝剂和缓冲液，R2试剂包含偶联有抗所述目的抗原的抗体的纳米微球和缓冲液，该纳米微球包括大纳米微球和小纳米微球，小纳米微球的平均粒径在50nm至250nm之间，大纳米微球的平均粒径在250nm至400nm之间，且大纳米微球的平均粒径与小纳米微球的平均粒径相差在50nm以上。由于平均粒径的差异，本发明的测定试剂盒对目的抗原的测定可兼顾灵敏度和线性范围，具有灵敏度高、检测范围宽的优点，而且检测性能媲美化学发光免疫分析法，避免化学发光分析仪封闭且昂贵等缺点，可以用于测定β‑HCG及其他抗原。

技术领域

本发明涉及免疫分析医学技术领域，具体涉及一种用于检测目的抗原如β-HCG的免疫胶乳比浊法测定试剂盒。

背景技术

目前常用的检测目的抗原的方法有胶体金法、放射免疫分析法(RIA)、酶联免疫分析法(ELISA)、化学发光免疫分析法(CLIA)和免疫比浊法。胶体金法存在灵敏度低、重复性差、无法定量分析等缺点。RIA存在放射性污染、标记物半衰期短、对操作者具有放射性损伤，且操作繁琐、时间长等缺点。ELISA存在灵敏度低、检测范围窄等缺点。CLIA灵敏度高，检测范围宽，但需在封闭式全自动化学发光检测系统上使用，需要昂贵的全自动化学发光免疫分析仪，从而限制了推广使用。

免疫比浊法是抗原抗体结合动态测定方法。当目的抗原与抗体在特定稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时，形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下，自液相析出，形成微粒，使反应液出现浊度。在抗体浓度固定的情况下，形成的免疫复合物的量随着检样中抗原量的增加而增加，反应液的浊度也随之增加。通过测定反应液的浊度与一系列标准品的相应浊度对照，即可计算出检样中抗原的含量。免疫比浊法包括免疫透射比浊法、免疫散射比浊法。免疫胶乳比浊法是将待测的目的抗原相对应的抗体包被在胶乳颗粒上，使抗原抗体结合物的体积增大，光通过之后，透射光和散射光的强度变化更为显著，从而提高检测的灵敏度，但在实际检测中发现，检测的线性范围不够宽。

发明内容

本发明的目的在于对现有的免疫胶乳比浊法的缺陷而提出一种新型的免疫胶乳比浊法测定试剂盒，该测定试剂盒在检测中能兼顾检测的灵敏度和线性范围。

本发明的目的通过如下的技术方案来实现：

在本发明的一些实施方案中，提供一种用于检测目的抗原的免疫胶乳比浊法测定试剂盒，包括R1试剂、R2试剂，R1试剂包含促凝剂和缓冲液，R2试剂包含偶联有抗目的抗原的抗体的纳米微球和缓冲液，纳米微球包括大纳米微球和小纳米微球，小纳米微球的平均粒径在50nm至250nm之间，大纳米微球的平均粒径在250nm至400nm之间，且大纳米微球的平均粒径与小纳米微球的平均粒径相差在50nm以上。

例如，小纳米微球的平均粒径可以为50nm、60nm、70nm、80nm、90nm、100nm、110nm、120nm、130nm、140nm、150nm、160nm、170nm、180nm、190nm、200nm、210nm、220nm、230nm、240nm、250nm，或者它们之间的任何数值，大纳米微球的平均粒径可以为260nm、270nm、280nm、290nm、300nm、310nm、320nm、330nm、340nm、350nm、360nm、370nm、380nm、390nm、400nm，或者它们之间的任何数值，且大纳米微球的平均粒径与小纳米微球的平均粒径相差在50nm以上，例如相差100nm、150nm、200nm、250nm、300nm、350nm。