[发明专利]一组桑树细菌性枯萎病病原菠萝泛菌的PCR检测引物及应用

说明书

本发明公开了一组桑树细菌性枯萎病病原菠萝泛菌(Pantoea ananatis)的PCR检测引物及应用，一组菠萝泛菌的PCR检测引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～2所示。本发明提供一组检测桑细菌性枯萎病病原菌菠萝泛菌的特异性PCR引物，并利用该引物建立了桑细菌性枯萎病病原菌菠萝泛菌的检测方法。本发明得到的引物具有特异性好和灵敏性高的优点，针对感染桑细菌性枯萎病病原菌菠萝泛菌的病株及根际土壤样本所提取的DNA都有非常好的检测效果，这对桑园桑树病害中桑细菌性枯萎病病原菌菠萝泛菌的快速检测具有重要意义。

技术领域

本发明涉及植物病害检测技术领域，更具体地，涉及一组桑树细菌性枯萎病病原菠萝泛菌的PCR检测引物及应用。

背景技术

桑在蚕桑产业发展和变革中，有着基础性的地位，起着先导性的作用。随着桑产业的转型，在桑树资源的综合利用及桑树产业的不断开发和桑全基因组测序完成，全面开展功能基因研究的背景下，桑树的基础研究将成为桑产业发展和创新的重要支撑。

桑细菌性枯萎病病害作为最重要的桑树细菌病之一，在我国浙江及华南蚕区发生较普遍且危害严重。该病对桑叶的产量影响非常大，严重阻碍蚕桑业发展。

桑树细菌性枯萎病病害特征较为典型，其为全株性病害，发病初期，上部分枝条枯萎褐化，叶片外缘先开始失水翻卷，随后，自上而下整株枯萎并开始脱落。剖开病株的茎、根的表皮，木质部有不同程度的黄化，褐化现象，产生褐色条纹，严重时木质部周身变褐变黑，根部腐烂。

桑细菌性枯萎病是一种典型的毁灭性突出病害，其病原多样化，包括肠杆菌属的阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)、阿氏肠杆菌(Enterobacter asburiae)、桑肠杆菌(Enterobacter mori.)三种病原，克雷伯氏杆菌属(Klebsiella)的肺炎杆菌(K.pneumoniae)、克雷伯氏菌(K.variicola)、产酸克雷伯氏菌(K.O xytoca)三种病原以及泛菌属(Pantoea)的菠萝泛菌(P.ananatis)一个病原。目前只对桑肠杆菌(E.mori)和阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)建立了分子检测方法，检测技术较为薄弱，严重影响了病害检疫及防治。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术没有针对引起桑树细菌性枯萎病的菠萝泛菌的检测方法不足，提供一组桑树细菌性枯萎病菠萝泛菌PCR检测引物及应用。

本发明的第一个目的是提供一组菠萝泛菌的PCR检测引物。

本发明的第二个目的是提供所述PCR检测引物在菠萝泛菌和/或桑树细菌性枯萎病的检测中的应用。

本发明的第三个目的是提供所述PCR检测引物在制备菠萝泛菌和/或桑树细菌性枯萎病的检测试剂盒中的应用。

本发明的第四个目的是提供一种菠萝泛菌的检测试剂盒。

本发明的第五个目的是提供一种菠萝泛菌的检测方法。

为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案予以实现的：

一组菠萝泛菌的PCR检测引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～2所示。

tagtactgcaggatgccgtccca(SEQ ID NO：1)；

ggcgttgtcactggtgatgacgt(SEQ ID NO：2)。

进一步本发明要求保护以上所述PCR检测引物在菠萝泛菌和/或桑树细菌性枯萎病的检测中的应用。

同时本发明要求保护以上所述PCR检测引物在制备菠萝泛菌和/或桑树细菌性枯萎病的检测试剂盒中的应用。

本发明还要求保护一种菠萝泛菌的检测试剂盒，包括以上所述检测引物。