[发明专利]一种采用分生孢子接种鉴定花生网斑病抗病性的方法有效
申请号: | 201910441671.4 | 申请日: | 2019-05-24 |
公开(公告)号: | CN110100685B | 公开(公告)日: | 2021-05-14 |
发明(设计)人: | 张新友;郑峥;齐飞艳;孙子淇;张利娜;房元瑾;张忠信;刘华;徐静;高伟;秦利;石磊;苗利娟;董文召;黄冰艳 | 申请(专利权)人: | 河南省农业科学院 |
主分类号: | C12N3/00 | 分类号: | C12N3/00;C12Q1/18;A01G22/40;A01G7/06;C12R1/645 |
代理公司: | 郑州市华翔专利代理事务所(普通合伙) 41122 | 代理人: | 张爱军 |
地址: | 450000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 采用 分生孢子 接种 鉴定 花生 网斑病 抗病性 方法 | ||
1.一种采用分生孢子接种鉴定花生网斑病抗病性的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)利用网斑病病原菌的分生孢子接种,在光暗交替条件下培养分生孢子器;
(2)破碎分生孢子器,制得分生孢子悬浮液;
(3)将分生孢子悬浮液喷雾接种花生幼苗,利用叶片病斑面积分析系统分析叶片病斑面积并计算病情指数,评价不同花生材料的网斑病抗病性;
步骤(1)中用于接种的网斑病病原菌的分生孢子的制备方法为:
①挑取网斑病病原菌菌丝接种于OA培养基上,于光暗交替下培养,产生零星分布的分生孢子器;
②挑取分生孢子器压碎于新的OA培养基上,于光暗交替下培养,获得密集分布的分生孢子器;
③收集分生孢子器破碎制成分生孢子悬浮液,用于分生孢子接种;
所述光暗交替为先进行光照培养16h,然后黑暗培养8h,如此循环交替进行;培养温度为25℃,培养时间为7-10d;
步骤(2)的具体方法为:收集分生孢子器,放入加有无菌水的球磨仪打样器中,以30Hz震频进行40s打样破碎,用3层无菌纱布过滤后,加入吐温-20,混匀即得。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中网斑病病原菌的分子孢子是接种于OA培养基。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)中分生孢子悬浮液的浓度为1×106-1×107个/ml。
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