[发明专利]一种细菌来源的果胶酶及其基因在审

专利信息
申请号: 201910442042.3 申请日: 2019-05-24
公开(公告)号: CN110066818A 公开(公告)日: 2019-07-30
发明(设计)人: 叶秀云;关怡;尹娣;王冬煌;吕超 申请(专利权)人: 福州大学
主分类号: C12N15/60 分类号: C12N15/60;C12N15/56;C12N15/55;C12N9/88;C12N9/26;C12N9/18;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/10;C12R1/19
代理公司: 福州元创专利商标代理有限公司 35100 代理人: 饶文君;蔡学俊
地址: 350108 福建省福州市闽*** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 果胶酶 基因 果胶酶基因 细菌来源 大肠杆菌细胞 大肠杆菌质粒 大肠杆菌 氨基酸序列 核苷酸分子 核苷酸序列 细胞 转化 克隆
【权利要求书】:

1.一种果胶酶基因,其特征在于:所述果胶酶基因其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.权利要求1所述的基因编码的果胶酶,其特征在于:所述果胶酶氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示。

3.一种含如权利要求1所述的果胶酶基因的重组载体,其特征在于:所述果胶酶基因的载体是大肠杆菌质粒。

4.根据权利要求3所述的重组载体,其特征在于:所述的载体为pET22b(+)-Pectinase。

5.一种含权利要求1所述的果胶酶基因的细胞,其特征在于:所述细胞选大肠杆菌细胞;所述细胞由权利要求3所述载体转化而得。

6.一种如权利要求1所述的果胶酶基因的的制备方法,其特征在于:从环境中筛选得到一株能在筛选培养基上产透明圈的微生物,通过16s rDNA分析鉴定为Bacillus licheniformis;根据NCBI中已有的果胶酶基因序列设计特异性引物,获得果胶酶的基因全长。

7.一种如权利要求3所述的重组载体的制备方法,其特征在于:所述果胶酶基因的重组载体的制备为:Bam HI、Hind Ⅲ双酶切空质粒pET22b(+)与果胶酶基因进行同源重组,得到大肠重组表达载pET22b(+)-Pectinase。

8.一种如权利要求5所述细胞的构建方法,其特征在于:所述细胞是用所述重组载体转化来构建的;所述细胞选大肠杆菌细胞,选用大肠杆菌构建表达Pectinase的重组细胞。

9.一种如权利要求2所述的果胶酶的表达方法,其特征在于:培养包含Pectinase编码序列的细胞或经转化的细胞,诱导其表达,收获表达产物:通过包含果胶酶编码序列的大肠杆菌发酵来生产果胶酶,并通过镍柱纯化得到了纯酶形式的目的蛋白。

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