[发明专利]高度近交实验用小型猪封闭群的繁育方法

说明书

本发明公开了一种高度近交实验用小型猪封闭群的繁育方法，其包括如下步骤：A)、F0世代小型猪父本和母本交配繁育F1世代，剔除不良个体；B)、对步骤A)未被剔除的F1世代小型猪OB基因进行检测，BB基因型的小型猪淘汰，AA、AB基因型的小型猪留种；C)、对步骤B)留种的F1世代进行基因纯合度检测，符合近交系数范围和基因组纯合度范围的种公猪和种母猪留种；D)、步骤C)留种的F1世代进行同胞交配繁育F2世代，重复剔除不良个体，并重复所述步骤B)和步骤C)；E)、重复步骤D)，直至封闭群数量稳定。本发明建立了一种繁育高度近交实验用小型猪封闭群的繁育方法，选育的小型猪的近交系数高，基因纯合度高。

技术领域

本发明属于畜牧选育技术领域，尤指一种高度近交实验用小型猪封闭群的繁育方法。

背景技术

上世纪八十年代，国外已经开始尝试小型猪在生物医学研究中的应用，系统研究了小型猪取代猴、犬成为新的实验中小动物，比较系统论述了小型猪作为实验动物模型在生物医学研究中的重大地位。小型猪在消化系统、骨骼系统、皮肤系统等方面与人类具有较大的相似性，既能解决人源器官缺乏，也能避开动物福利因素，是人类异种移植开发的研究热点。

近年来，我国生物医学发展越来越快，对实验用小型猪需求日渐增长和迫切。同时，实验用小型猪应用也越来越广泛，如人的血型改造、皮肤移植等，也对实验用小型猪标准化提出更高的要求。而我国国内小型猪的品种虽然非常丰富，但大多数品种为地方品种，是长期放任自然繁育形成的具有地方特色的品种。这些品种猪各自有其自己的特点，杂交程度也非常大，甚至有些毛色也不统一。如海南五指山小型猪，该品种有白色、黑色和花色三种毛色。这些小型猪近交系数不高，不符合实验动物对近交系数、基因高度纯合方面的要求，因此繁育高度近交的实验用小型猪群体，能为生物医学、生命科学等领域提供近交系数高，基因纯合度高的实验用小型猪。

因此，有必要选育国内高度近交实验用小型猪近交系和封闭群，从遗传学、微生物学、环境、营养标准等多方面开发小型猪资源。

发明内容

本发明的目的之一是建立一种繁育高度近交实验用小型猪封闭群的繁育方法，以选育高度近交实验用小型猪近交系和封闭群，实现这一目的的有效方法之一是采用F0世代父本和母本繁育F1世代，F1世代通过同胞交配繁育F2世代，F2-F15世代均通过同胞交配繁育群体。每一世代中，先从传统育种角度淘汰部分不良个体，然后通过OB基因检测留种AA、AB基因型小型猪，并计算近交系数和基因组纯合度，剔除近交系数范围在0.15-0.32、基因组纯合度范围为53％-67％之外的个体，不纳入种公猪和种母猪范围。重复繁育筛选，直至封闭群数量稳定。

本发明的繁育高度近交实验用小型猪封闭群的繁育方法，包括如下步骤：

A)、F0世代小型猪父本和母本交配繁育F1世代，剔除不良个体；

B)、对步骤A)未被剔除的F1世代小型猪OB基因进行检测，BB基因型的小型猪淘汰，AA、AB基因型的小型猪留种；

C)、对步骤B)留种的F1世代进行基因纯合度检测，符合近交系数范围和基因组纯合度范围的种公猪和种母猪留种；

D)、步骤C)留种的F1世代进行同胞交配繁育F2世代，重复剔除不良个体，并重复所述步骤B)和步骤C)；

E)、重复步骤D)，直至封闭群数量稳定。

根据本发明，所述步骤B)中，采用PCR-RFLP方法检测小型猪的基因型。

根据本发明，所述步骤B)中，利用序列表1中序列1的核苷酸序列和序列2的核苷酸序列组成的引物对进行PCR扩增，并检测PCR产物。

根据本发明，步骤B)中，留种AA基因型的小型猪。

根据本发明，所述近交系数的计算公式为：

其中，