[发明专利]用于指导阿托伐他汀药物个体化用药相关基因检测的引物探针组合及试剂盒及应用

说明书

本发明公开了一种用于指导阿托伐他汀药物个体化用药相关基因SNP的特异性引物探针组合，其特征在于，所述引物探针组合包括针对rs4149056、rs1045642基因SNP的特异性引物探针组合。本发明还公开了包含所述引物组合的试剂盒及其应用。本发明的有益效果在于：提供了一种快捷的用于指导阿托伐他汀药物个体化用药相关基因SNP的分型试剂盒及应用，应用本发明获得的检测结果精确可靠，且成本较低，具有较好的实用性。

技术领域

本发明涉及体外诊断技术领域，具体涉及一种用于指导阿托伐他汀药物个体化用药相关基因检测的引物探针组合及试剂盒及应用。

背景技术

患者在患有高脂血症的情况下，容易引发冠心病，两者合并在临床上会出现不稳定型心绞痛和猝死等。在冠心病合并高脂血症的治疗防治中，要增加对胆固醇和甘油三酯摄入量的控制。经过临床研究表明，冠心病的发展情况，会受到血脂(主要是LDL-C)的抑制，由此保障患者的生存质量和生存时间。在此基础上，给冠心病合并高脂血症患者服用他汀类药物，能够有效控制血脂，产生抗炎效果，稳定粥样斑块生长。

阿托伐他汀钙片是他汀类药物的主要代表，能够有效抑制患者体内HMG-CoA还原酶的形成，从而减少体内胆固醇。患者细胞内总胆固醇的数量减少，就会促进细胞生成，加速低密度脂蛋白受体加速，增强肝脏表面LDL受体的数目，提高活性。受体降解途径代谢，会降低血清中LDL含量。但用药过量会产生横纹肌溶解、肌痛肌炎、急性肝功能衰退、肝炎、四肢活动转改、感觉异常、头痛失眠、性功能障碍等危害。

通过检测他汀类药物靶点基因、代谢相关基因，可以有效评估药物疗效和毒副作用，为医生合理用药提供依据。ABCB1基因突变会影响阿托伐他汀的转运和代谢，进而影响药物疗效；SLCO1B1*5等位基因突变使肌肉他汀类药物暴露增加，与肌病的发生相关。

他汀类药物治疗效果存在明显的个体化差异，随之而来的毒副作用也严重危害病患的健康。通过检测阿托伐他汀代谢、转运或作用靶点基因，可以及早发现不同个体对阿托伐他汀的药物敏感程度，从而实现阿托伐他汀的“个体化”用药，增强其用药剂量的依从性，以降低用药剂量不当引起的风险，提高治疗疗效。

目前市场上采用的基因多态性检测技术有PCR-RFLP，其主要原理是通过应用特异性限制性内切酶消化PCR扩增产物，并根据消化位点是否消失来判断其变异存在与否，但该方法操作复杂，样本量多时易造成PCR产物的交叉污染且容易出现酶切不充分或酶切过度而出现假阴性或假阳性结果，可靠性低。

多重PCR方法尽管特异性有所提高，但是这种方法的原理仍然是基于普通PCR的原理，引物特异性以及低保真Taq酶等这些因素均可造成对结果的影响。DNA测序法虽然是目前进行基因诊断的金标准，但步骤繁琐，过程复杂，试剂价格昂贵，容易出现样本间的交叉污染而导致测序失败；另外测序仪的装备也超出了一般临床检验实验室的承受范围。

高分辨率熔解曲线法是一种快速，简便，经济，实用的分型方法，但基因分型依赖于仪器温度控制的精密性，假阳性高。Taqman探针的方法采用特异性的荧光标记的探针，特异性强，灵敏度高且操作方便，快速。

发明内容

本发明的，目的是为了解决传统临床经验医疗方式诊断及阿托伐他汀药物用药时易出现临床用药不良反应且没有合适的试剂盒产品的技术问题而提供了新的引物组合及其试剂盒及其应用。

本发明的目的之一在于提供一种用于指导阿托伐他汀药物个体化用药相关基因SNP的引物探针组合。

本发明的目的之二在于提供包含所述相关基因SNP的引物探针组合的试剂盒

本发明的目的之三在于所述试剂盒的应用。

为实现本发明的目的之一，所采用的技术方案是：