[发明专利]一种荷载化疗药物的双敏感型靶向纳米粒制剂及制备方法

权利要求书

1.一种荷载化疗药物的双敏感型靶向纳米粒，其特征是，

所述荷载化疗药物的双敏感型靶向纳米粒结构为BSA/Gel-SS-PTX/PTX-SS-COOH，其中BSA为牛血清白蛋白，Gel为明胶，PTX-SS-COOH为紫杉醇-二硫代二丙酸结合物，Gel-SS-PTX为PTX-SS-COOH中的羧基与明胶上氨基反应结合物，

所述明胶为巯基化明胶；

所述明胶与紫杉醇的摩尔比为1:0.5~2；

所述BSA/Gel-SS-PTX/PTX-SS-COOH制备方法为：取0.010 g PTX-SS-COOH溶于乙腈溶液，加入0.004 g 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，PTX-SS-COOH: 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐=1:2，摩尔比，氮气保护下活化1 h；再加入0.005 g N-羟基琥珀酰亚胺，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐: N-羟基琥珀酰亚胺=1:2，摩尔比，室温条件下活化1 h，氮气保护；取0.010 g 巯基化明胶溶于去离子水，并将活化后的反应液缓慢滴入巯基化明胶水溶液中，调节水-乙腈的比例，使反应液澄清，乙腈与水的体积比为1:1，40 ℃下氮气保护反应24 h；反应结束后，取0.0026 g 牛血清白蛋白溶于少量去离子水中，调整pH值为6.8，用0.22 μm的水系滤膜过滤，将BSA水溶液在搅拌条件下缓慢滴入反应液中，氮气保护下反应24 h；最后将反应液转移至透析袋中，MWCO=8000-14000，去离子水透析24 h，期间换透析液3-4次；取袋中溶液，8000 rpm下离心10 min，上清液即为荷载化疗药物的双敏感型靶向纳米粒BSA/Gel-SS-PTX/PTX-SS-COOH。

2.如权利要求1所述的荷载化疗药物的双敏感型靶向纳米粒，其特征是，所述荷载化疗药物的双敏感型靶向纳米粒截留分子量不低于8000。

3.一种权利要求1或2所述的荷载化疗药物的双敏感型靶向纳米粒的制备方法，其特征是，PTX-SS-COOH的合成：分别称取紫杉醇，二硫代二丙酸酐和4-二甲胺基吡啶，紫杉醇、二硫代二丙酸酐与4-二甲胺基吡啶的摩尔比为1:1:5，置于25 mL圆底烧瓶中，加入2 mL吡啶，在35 ℃的氮气保护下反应24 h；反应液在80 ℃下旋转蒸发除去大部分吡啶，并加入稀盐酸除去未蒸干的吡啶，洗涤液用二氯甲烷萃取，共重复三次，用0.22 μm的滤膜除去未反应的4-二甲胺基吡啶；将二氯甲烷蒸干，放入真空干燥箱中干燥过夜；

巯基化明胶的合成：称取对巯基苯甲酸、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐于25 mL圆底烧瓶中，对巯基苯甲酸与1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的摩尔比为1:1，加入400 μL无水乙醇，超声使其溶解；再加入800 μL 0.1 M氢氧化钠溶液和800 μL去离子水，超声使溶液均匀，室温并在氮气保护下下活化1 h；在反应液中加入N-羟基琥珀酰亚胺，N-羟基琥珀酰亚胺与1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的摩尔比为2:1，室温并在氮气保护下继续活化1 h；称取0.1 g A型明胶，加入10 mL去离子水溶胀并溶解，在超声条件下将上述活化液缓缓滴入明胶溶液，40 ℃下氮气保护反应4 h；反应液放入透析袋中，MWCO=8000-14000，DMSO透析24 h，再用去离子水透析24 h，冻干后得到产物巯基化明胶；

BSA/Gel-SS-PTX/PTX-SS-COOH的合成：取0.010 g PTX-SS-COOH溶于乙腈溶液，加入0.004 g 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，PTX-SS-COOH: 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐=1:2，摩尔比，氮气保护下活化1 h；再加入0.005 g N-羟基琥珀酰亚胺，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐: N-羟基琥珀酰亚胺=1:2，摩尔比，室温条件下活化1 h，氮气保护；取0.010 g 巯基化明胶溶于去离子水，并将活化后的反应液缓慢滴入巯基化明胶水溶液中，调节水-乙腈的比例，使反应液澄清，乙腈与水的体积比为1:1，40 ℃下氮气保护反应24 h；反应结束后，取0.0026 g 牛血清白蛋白溶于少量去离子水中，调整pH值为6.8，用0.22 μm的水系滤膜过滤，将BSA水溶液在搅拌条件下缓慢滴入反应液中，氮气保护下反应24 h；最后将反应液转移至透析袋中，MWCO=8000-14000，去离子水透析24 h，期间换透析液3-4次；取袋中溶液，8000 rpm下离心10 min，上清液即为荷载化疗药物的双敏感型靶向纳米粒BSA/Gel-SS-PTX/PTX-SS-COOH。