[发明专利]一种猪肺源粗品肝素钠精制方法

说明书

本发明公开了一种猪肺源粗品肝素钠的精制方法，通过乙酸钠缓冲液溶解粗品肝素，离子交换柱层析,氯化钠‑乙酸钠溶液梯度洗脱，透析，干燥浓缩，化钠溶解，再冷冻干燥得到精品肝素。本发明方法对猪肺中提取出的肝素进行精制，减少了粗品肝素中杂质，提升肝素活性，解决猪肺中提取粗品肝素钠杂质多难以满足生产商采购需求的问题，具有推广应用价值。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种猪肺源粗品肝素钠精制方法。

背景技术

肝素钠是由肝素分子与钠盐结合而成的天然酸性黏多糖化合物，带强负电荷平均分子量为15000道尔顿。系麦克伦在1916年研究凝血问题时，从狗的肝脏中首次发现，此后引起了人们的兴趣和关注。肝素由哺乳动物体内结缔组织的肥大细胞产生，广泛存在于各种组织器官中，它不溶于有机溶剂，显酸性，带负电荷，对酶稳定。在自然界中，肝素广泛分布于哺乳动物的腺体、肌肉、肠粘膜和血液中，其中以肠粘膜和肺脏的含量最为丰富。肝素钠是用于防治血栓形成或栓塞性疾病；各种弥漫性血管内凝血；也用于血液透析、体外循环、导管术、微血管手术等操作中及某些血液标本或器械的抗凝处理。

肝素钠目前的主要来源是猪小肠，国际市场对肝素原料药的需求十分强劲，然而猪小肠价格连年上升，给肝素原料药生产业带来巨大冲击。越来越多人将目光放于肝素含量丰富的猪肺中，然而猪肺中含有大量蛋白质等杂质，利用猪肺提取出粗品肝素往往达不到肝素类药物生产商的收购需求，此时一种猪肺源肝素精制工艺的需求显得极为紧迫。

发明内容

针对现有猪肺提取肝素钠生产技术存在的问题，本发明提供一种猪肺源粗品肝素钠的精制技术，扩大肝素钠的生产来源，带来一定社会效益。

本发明精制肝素钠的目的具体通过以下技术方案实现：

一种从猪肺中提取肝素钠的方法，包括以下步骤：

1)将粗品肝素钠溶解于乙酸钠缓冲液得到肝素溶解液，置于离子交换柱中层析；

2)氯化钠－乙酸钠溶液梯度洗脱，合并洗脱峰处洗脱液；

3)将合并的洗脱液置于超滤膜进行超滤，浓缩，收集超滤液，进行干燥；

4)将干燥物溶解于氯化钠溶液中，冷冻干燥即得到精制肝素钠。

进一步的，步骤(1)中粗品肝素钠与乙酸钠缓冲溶液的质量比为1:10，所述的乙酸钠缓冲液浓度为0.05mol/L，PH值为5.6。

进一步的，步骤(1)中层析的离子交换柱选自DEAE－Sepharose fast flow，流动相为0.1mol/L的NaNO₃，流速为0.6ml/min。

进一步的，步骤(2)中氯化钠浓度为1.65mol/L时，得到洗脱峰。

进一步的，步骤(3)中所述的超滤膜规格为6000-10000分子量。

进一步的，步骤(4)中干燥物与氯化钠溶液的质量比为1:20，氯化钠溶液的质量分数为2％。

本发明的有益效果为：

本发明采用猪肺中提取出的粗品肝素钠为原材料，对其进行除杂，纯化，提高其品质，使其满足肝素类药物生产厂家收购粗品肝素钠的需求。

实际生活中猪肺往往被当做废物处理，在造成浪费的同时如何处理这些“废物”也是一大难题，随着肝素原料药市场的扩大以及肝素钠生产原料小肠价格的飞升，越来越多人尝试利用猪肺进行肝素钠的提取，但猪肺中所含蛋白质等杂质多，生产出的粗品肝素往往含有大量杂质，杂质多活性低，达不到生产厂家的采购需求，生产出的肝素钠为“废品”。本发明技术采取离子交换层析法对肝素进行精制，极大程度提高肝素纯度，使用“废品”肝素钠生产出精制肝素钠。

具体实施方式