[发明专利]CD39内化调控对P2X7R活化的作用

说明书

本发明公开了CD39内化调控对P2X7R活化的作用，本发明的有益效果是提供多种Toll样受体(TLR)配体可促进BMDCs细胞表面CD39内化，进而抑制细胞外ATP的降解，导致细胞外ATP的累积后激活P2X7R信号通路，从而促进炎症反应。同时TLR配体介导的BMDCs中CD39内化的诱导是由MyD88途径介导的。该发明在控制免疫反应和炎症方面具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，涉及CD39内化调控对P2X7R活化的作用。

背景技术

P2X7R广泛表达与包括骨髓源性树突状细胞(BMDCs)在内的免疫细胞表面，胞外高浓度的三磷酸腺苷(ATP)与其结合后激活信号通路在免疫反应中发挥重要作用。已知P2X7R信号通的激活需要局部高浓度的ATP累积，细胞外高浓度ATP的积累一方面需要细胞释放大量ATP，另一方面需要减少ATP的降解。已知核苷三磷酸二磷酸水解酶-1(CD39)是细胞外ATP代谢的关键酶之一，因此免疫炎症病程中进入体内的病原相关分子模式如Toll样受体(TLR)配体等，能否通过调节BMDCs中CD39的表达和功能，进而导致细胞外ATP的堆积，激活P2X7R信号通路，促进炎症反应。

发明内容

本发明的目的在于提供CD39内化调控对P2X7R活化的作用，本发明的有益效果是提供多种Toll样受体(TLR)配体可促进BMDCs细胞表面CD39内化，进而抑制细胞外ATP的降解，导致细胞外ATP的累积后激活P2X7R信号通路，从而促进炎症反应。同时TLR配体介导的BMDCs中CD39内化的诱导是由MyD88途径介导的。该发明在控制免疫反应和炎症方面具有重要的应用价值。

本发明提出了CD39内化调控对P2X7R活化的作用。

进一步，TLR4配体脂多糖(LPS)处理BMDCs骨髓源性树突状细胞后，BMDCs细胞膜上所述CD39数量减少，而细胞上的CD39总量保持不变。

进一步，LPS可促进BMDCs上所述CD39内吞，减少CD39水解ATP的作用，增加细胞外ATP堆积，激活P2X7R嘌呤能离子通道型受体7，进而促进BMDCs炎性因子IL-1β的生成和释放。

进一步，除了polyI:C聚肌胞苷酸,Toll样受体3(TLR3)配体,所有其他的Toll样受体配体如TLR 1/2配体,Pam3csk4三酰脂肽；TLR2配体,PGN-BS(从革兰氏阳性细菌枯草芽孢杆菌中纯化的肽聚糖)；TLR4配体,LPS；TLR7/8配体,CL075(一种噻唑并喹啉酮衍生物，其激活人外周血单核细胞中的TLR7、TLR8)，TLR9配体,ODN 1585(A类CpG寡核苷酸特异性激活小鼠TLR9)都显示出类似促进BMDCs细胞膜上CD39的内化作用。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。

为了推断TLR配体可以改变BMDCs中CD39的表达或活性，我们选用TLR4配体LPS处理BMDCs细胞，并检测BMDCs中CD39的表达。TLR配体是影响DCs在免疫应答中功能的重要因素。DCs表达各种类型的TLR，它们的功能由病原体相关分子模式(PAMPS)强烈塑造。TLR配体的结合激活相关信号通路促进DC成熟、细胞因子产生和抗原呈递功能。研究显示在某些细胞类型和DC中存在CD39。当LPS处理的BMDCs中膜CD39表达显著降低时，这些细胞中的Cd39mRNA和全细胞总CD39表达与未处理的BMDCs中的水平相同,揭示LPS促进BMDCs膜CD39的内化。LPS诱导的膜CD39表达下调可能是由于表面暴露的CD39被运输到细胞质中(内吞作用)引起。