[发明专利]一种雷公藤甲素核酸适配体偶联物的制备方法

权利要求书

1.一种雷公藤甲素核酸适配体偶联物的制备方法，包括：

1)将雷公藤甲素与对硝基苯基氯甲酸酯反应，制备获得对硝基苯基甲酸雷公藤甲素酯；

2)将对硝基苯基甲酸雷公藤甲素酯与核酸适配体反应，制备获得所述雷公藤甲素核酸适配体偶联物。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中，反应在缚酸剂存在的条件下进行；

和/或，所述步骤1)中，雷公藤甲素与对硝基苯基氯甲酸酯的摩尔比为1：1.2～10，优选为1：3～6；

和/或，所述步骤1)中，反应在反应溶剂存在的条件下进行；

和/或，所述步骤1)中，反应温度为10～40℃，优选为20～30℃。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述缚酸剂选自有机碱；

和/或，所述步骤1)中，雷公藤甲素与缚酸剂的摩尔比为1：0.002～0.25，优选为1：0.05～0.08；

和/或，所述步骤1)中，反应溶剂选自卤代烷烃类溶剂。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述缚酸剂选自有机碱，优选的，所述缚酸剂选自吡啶、DMAP中的一种或多种的组合；

和/或，所述步骤1)中，反应溶剂选自二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷中的一种或多种的组合。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中，还包括：加水淬灭，有机溶剂萃取，有机相脱溶。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中，反应在碱存在的条件下进行；

和/或，所述步骤2)中，对硝基苯基甲酸雷公藤甲素酯与核酸适配体的摩尔比为1：0.001～0.5，优选为1：0.005～0.1；

和/或，所述步骤2)中，反应在反应溶剂存在的条件下进行；

和/或，所述步骤2)中，反应温度为10～50℃，优选为30～40℃；

和/或，所述步骤2)中，所述核酸适配体包括氨基，优选的，所述核酸适配体的5’端包括氨基；

和/或，所述步骤2)中，反应时间≤4小时，优选为15min～1h；

和/或，所述步骤2)中，反应在避光的条件下进行。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中，所述碱选自有机碱；

和/或，所述步骤2)中，反应溶剂选自水、有机溶剂；

和/或，所述步骤2)中，所述核酸适配体选自Sgc8c核酸适配体、AS1411核酸适配体中的一种或多种的组合。

8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中，所述碱选自三乙胺、N,N-二异丙基乙胺中的一种或多种的组合；

和/或，所述步骤2)中，作为反应溶剂的有机溶剂选自非质子极性溶剂，更优选选自N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙腈中的一种或多种的组合。

9.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中，还包括：加水淬灭，有机溶剂萃取，有机相脱溶。

10.如权利要求1～9任一权利要求所述的制备方法制备获得的雷公藤甲素核酸适配体偶联物。