[发明专利]一种悬浮细胞培养耗材的制备方法

说明书

本发明公开了一种悬浮细胞培养耗材的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤：1)培养耗材表面等离子改性处理；2)改性处理后在培养耗材表面包覆一层悬浮细胞培养液。本发明提供一种操作简便、价格便宜、对设备要求低，并无需改变细胞原先培养体系就能达到细胞悬浮培养目的的细胞培养耗材。可以应用于肿瘤细胞或正常细胞未贴附球状原代培养、血细胞的研究、蛋白表达细胞系的悬浮培养以及拟胚体形成等。提高细胞生物学研究的准确性，降低实验室培养设备要求和成本。

技术领域

本发明涉及生物耗材技术领域，具体涉及一种悬浮细胞培养耗材的制备方法。

背景技术

悬浮细胞培养耗材是一种可以用于贴壁细胞和半贴壁细胞在血清培养体系下悬浮培养的生物耗材。在研究疫苗制备、抗体药物制备以及细胞分化时一般会采用动物细胞的悬浮培养。悬浮培养具有无需消化即可传代；能够不断增值，形成高密度细胞；以及细胞状态均一，可为研究细胞的生长、分化创造条件等优点。

市面上常见的悬浮细胞培养瓶，其结构为瓶身圆柱形，瓶颈两侧有出口便于连接空气过滤器、培养基的倒入与倾出、接种或接入pH电极等，瓶颈上方盖子内接入搅拌桨，搅拌桨底部有搅拌子，通过机械搅拌的方式使细胞悬浮生长。然而机械搅拌的剪切力势必会对细胞产生一定伤害，并且这种培养方法对于细胞生长需要的温度和二氧化碳较难进行控制。

市面上有公司推出一款悬浮细胞培养瓶，用聚苯乙烯材料注塑而成，培养表面为疏水表面，未经TCT组织培养表面处理，这种培养表面贴壁细胞难以有效贴壁，由于贴壁不牢，部分细胞悬浮生长部分细胞半贴壁生长。

在过去的研究和应用中，细胞的悬浮培养都是采用传统的悬浮细胞驯化筛选、转瓶培养系统或生物反应器等方法来进行。悬浮细胞驯化筛选的实质是应用细胞生物学技术，结合特定细胞的营养需求进行培养基优化，以筛选出适合悬浮培养的细胞株。然而，单纯采用驯化细胞的方法，除了会造成细胞培养效果不理想的情况外，筛选的细胞形状可能会发生改变，影响实验结果。细胞培养转瓶是一种中间有带桨叶的细胞培养容器。使用时将转瓶放置在转瓶机上，带动桨叶转动，使培养基由静态变为动态。转瓶培养系统存在着单位体积提供的细胞生长的体积小、细胞生长密度低、使用成本高、劳动强度大和复杂的细胞剪切力控制等缺点，不能满足现代生命科学研究领域的要求。生物反应器作为细胞培养转瓶的升级，解决了细胞生长的体积小、细胞生长密度低、劳动强度大、复杂的细胞剪切力控制等缺点，但是设备过于昂贵，无法在科研实验室普及。因此，在细胞培养领域，越来越需要一种操作简便、成本低、对设备要求低，并无需改变细胞原先培养体系就能达到细胞悬浮培养目的的细胞培养耗材。

因此，亟待一种操作简便、价格便宜、对设备要求低，并无需改变细胞原先培养体系就能达到细胞悬浮培养目的的细胞培养耗材。可以应用于肿瘤细胞或正常细胞未贴附球状原代培养、血细胞的研究、蛋白表达细胞系的悬浮培养以及拟胚体形成等。提高细胞生物学研究的准确性，降低实验室培养设备要求和成本。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提出了一种操作简便、价格便宜、对设备要求低，并无需改变细胞原先培养体系就能达到细胞悬浮培养目的的细胞培养耗材。可以应用于肿瘤细胞或正常细胞未贴附球状原代培养、血细胞的研究、蛋白表达细胞系的悬浮培养以及拟胚体形成等。提高细胞生物学研究的准确性，降低实验室培养设备要求和成本。

为了达到上述目的，本发明的技术方案如下：

一种悬浮细胞培养耗材的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤：

1)培养耗材表面等离子改性处理；

2)改性处理后在培养耗材表面包覆一层悬浮细胞培养液。