[发明专利]一种链霉亲和素磁性微球的制备方法

权利要求书

1.一种链霉亲和素磁性微球的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤：

1）制备羧基磁性微球；

2）羧基磁性微球通过活化偶联上链霉亲和素制备得到链霉亲和素磁性微球；

所述制备羧基磁性微球包括以下步骤：

1.1）通过FeCl₃•6H₂O 制备得到Fe₃O₄磁核；

1.2）以Fe₃O₄为磁核，SiO₂为壳，制备得到Fe₃O₄@ SiO₂磁性微球；

1.3）加入MPS，MPS为改性聚苯乙烯，以Fe₃O₄为磁核，MPS和SiO₂的聚合物为壳，制备得到Fe₃O₄@ SiO₂-MPS磁性微球；

1.4）以Fe₃O₄@ SiO₂-MPS为磁核，GMA和MBA的聚合物为壳，GMA为甲基丙烯酸缩水甘油酯，MBA为2-巯基苯甲酸，制备得到Fe₃O₄@ SiO₂-MPS@P(C₇H₁₀O₃-C₇H₆O₂S)；

1.5）加入碳酸钠、碳酸氢钠和6-氨基己酸，硼氢化钠，反应制备得到Fe₃O₄@ SiO₂-MPS@P(C₇H₁₀O₃-C₇H₆O₂S)-COOH，即为羧基磁性微球；

所述步骤1.2）反应过程中，每隔30-40min给超声仪换水防止反应温度高于50℃；

所述羧基磁性微球的粒径为250-300nm；

所述制备链霉亲和素磁性微球包括以下步骤：

2.1）羧基磁性微球通过活化缓冲溶液洗涤；

2.2）加入含碳二亚胺的活化缓冲溶液和含N-羟基硫代琥珀酰亚胺的活化缓冲溶液活化13-17min;

2.3）加入链霉亲和素溶液反应1.5-2.5h；

2.4）用牛血清蛋白溶液封闭1.5-2.5h，洗涤保存，制备得到链霉亲和素磁性微球；

步骤2.2)中的碳二亚胺的浓度为15-25mg/ml； N-羟基硫代琥珀酰亚胺的浓度为15-25mg/ml；

步骤2.4）中的牛血清蛋白溶液的浓度为0.5 mg/ml -1.0 mg/ml；

步骤2.1）中所述活化缓冲溶液包括：0.025%-0.075%的聚山梨酯-20和0.05M-0.1M的吗啉乙磺酸。

2.根据权利要求1所述的链霉亲和素磁性微球的制备方法，其特征在于，制备羧基磁性微球的步骤1.5）后还包括以下制备步骤，通过磁性分离器分离羧基磁性微球，用纯化水反复洗涤至少5次以上，将羧基磁性微球保存在纯化水内，羧基磁性微球质检合格，投入下一步制备链霉亲和素磁性微球。

3.根据权利要求1所述的链霉亲和素磁性微球的制备方法，其特征在于，所述活化缓冲溶液的pH值为5.0-6.0。