[发明专利]核盘菌SsMAS3基因及其在植物菌核病抗性育种中的应用

权利要求书

1. 核盘菌SsMAS3基因或寄主诱导沉默表达核盘菌SsMAS3基因的载体在十字花科植物菌核病抗性育种中的应用，其特征在于，核盘菌SsMAS3基因编码氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的蛋白。

2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述核盘菌SsMAS3基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

3. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述载体的构建方法包括以下步骤：克隆如权利要求1或2所述的核盘菌SsMAS3基因的部分编码序列，将其正义序列和反义序列分别与SEQ ID No.3所示核苷酸序列的两端相连得到SsMAS3基因的RNAi结构，将所述RNAi结构接入植物表达载体的启动子和终止子之间得到所述寄主诱导沉默表达载体。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述载体的构建方法包括以下具体步骤：

（1）克隆SsMAS3基因的部分编码序列，将其正义序列和反义序列分别连入载体pCIT的内含子两端，构建沉默表达载体pSimas3，所述正义序列、pCIT 的内含子和反义序列连接形成的核苷酸片段为SsMAS3基因的RNAi结构；

（2）将SsMAS3基因的沉默表达载体中的RNAi结构连入植物表达载体的启动子和终止子之间，得到所述寄主诱导沉默表达载体。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述沉默表达载体pSimas3中含有潮霉素和氨苄青霉素抗性元件。

6. 根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述植物表达载体为pBinGlyRed3，含有种子特异型的Glycinin启动子和Gly-term终止子的载体，所述SsMAS3基因的RNAi结构通过多克隆位点插入所述Glycinin启动子和所述Gly-term终止子之间，所述多克隆位点具体为EcoRI、XbaI、XmaI、SmaI和XhoI；所述植物表达的载体中还含有卡那霉素（Kana）抗性元件，同时包含一个红色荧光蛋白的筛选标记，DsRed的启动子为 CMV启动子，终止子为Nos终止子。

7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，采用寄主诱导沉默表达核盘菌SsMAS3基因的载体转化农杆菌，农杆菌浸花法转化植物的花序得转化后的花序，将植物培养至种子成熟，利用基因标记挑选转化成功的植株。