[发明专利]一种快速检测野外黄河鲤鱼产卵场的方法

说明书

本发明公开了一种快速检测野外黄河鲤鱼产卵场的方法，具体包括以下步骤：步骤1：在黄河区域内寻找疑似产卵场的地点作为检测对象，并在鲤鱼繁殖季节对检测对象所在地点进行水样采集；步骤2：将采集的水样进行抽滤，对抽滤后的滤膜提取DNA；步骤3：对提取的DNA进行荧光定量PCR分析，根据分析结果比较各采样地点的目的基因的表达含量，目的基因表达含量高的即为黄河鲤鱼的产卵场的位置。本发明通过检测水样中的目的基因的含量可以快速准确鉴定黄河鲤鱼产卵场的位置，本发明相较传统的寻找产卵场的方法节省大量的人力物力和财力。

技术领域

本发明属于动物分子育种方法技术领域，具体涉及一种快速检测野外黄河鲤鱼产卵场的方法。

背景技术

黄河是我国第二大河流，全长5464公里，流域面积75万平方公里，素有铜头、铁尾、豆腐腰之称，穿越河南境内的692公里，主要位于豆腐腰上。孟津以东河道开始放宽，两岸堤距一般10公里左右，最宽处可达20公里，河床宽而浅，非汛期含沙量11.3-25.0厘米，水中富含水生生物生长所需的各种营养盐类。该流域(河南段)气候温和，年日照时间和鱼类生长期长，黄河滩生长着大量的野生杂草可作为鱼类饲料，这些都是发展渔业生产的优越条件。也是历史上我省境内河段盛产优质黄河鲤的主要原因。黄河鲤同淞江鲈鱼，兴凯湖鱼、松花江鲑鱼被共誉为我国四大名鱼。黄河鲤，自古就有岂其食鱼，必河之鲤、洛鲤伊鲂，贵如牛羊之说，向为食之上品。黄河鲤还以其肉质细嫩鲜美，金鳞赤尾、体型梭长的优美形态，驰名中外，是我省和我国的宝贵鱼类资源。鲤鱼跳龙门的传说，几乎是家喻户晓。白居易等古代诗人都曾为其写诗作赋，称其为龙鱼。民间流传有黄河三尺鲤，本在孟津居，点额不成龙，归来伴凡鱼等美好诗句。由于黄河非常巨大，每年黄河鲤鱼的产卵场不是固定不定的，所以科研人员需花费大量的人力和物力去准确寻找黄河鲤鱼的产卵场。

发明内容

本发明的目的是提供一种快速检测野外黄河鲤鱼产卵场的方法，具体包括以下步骤：

1.一种快速检测野外黄河鲤鱼产卵场的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

步骤1：在黄河区域内寻找疑似产卵场的地点作为检测对象，并在鲤鱼繁殖季节对检测对象所在地点进行水样采集；

步骤2：将采集的水样进行抽滤，对抽滤后的滤膜提取DNA；

步骤3：对提取的DNA进行荧光定量PCR分析，根据分析结果比较各采样地点的目的基因的表达含量，目的基因表达含量高的即为黄河鲤鱼的产卵场的位置。

本发明的特点还在于，

步骤3中荧光定量PCR反应所用的引物序列为：

F:GGTCGTATCGGAATCGTG

R:TCCAAGCGTACCAGAACTT。

步骤3中荧光定量PCR反应的反应程序为：94℃预变性3分钟；94℃变性30秒，退火温度复性30秒，72℃延伸30秒，40个循环；72℃延伸5分钟；4℃保存，溶解曲线为以0.2℃的增幅从65℃递增到95℃。

步骤3中荧光定量PCR反应的反应体系为：DNA为2ul、引物各1ul、超纯水为6ul、SYBR Taq为10ul。

本发明的有益效果是:

本发明一种快速检测野外黄河鲤鱼产卵场的方法，通过检测水样中的目的基因的含量可以快速准确鉴定黄河鲤鱼产卵场的位置。本发明相较传统的寻找产卵场的方法节省大量的人力物力和财力。

附图说明

图1是一种快速检测野外黄河鲤鱼产卵场的方法实施例荧光定量表达结果示意图；

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式对本发明进行详细说明。