[发明专利]一种用于制备ELISA鼠单克隆包被抗体和兔多克隆检测抗体的多肽及其应用

说明书

本发明公开了一种用于制备ELISA鼠单克隆包被抗体和兔多克隆检测抗体的多肽及其应用，属于生物医学技术领域。所述多肽为对类过敏反应特异性受体MRGPRX2蛋白的具有免疫原性的多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。该多肽为类过敏反应特异性受体MRGPRX2蛋白的具有免疫原性的多肽，可用于制备ELISA鼠单克隆包被抗体和兔多克隆检测抗体，成功制备了双抗体夹心ELISA方法，其中单克隆抗体为包被抗体，多克隆抗体为检测抗体，验证了其在临床中的应用。这将有助于类过敏反应特异性受体MRGPRX2的研究工作，对临床上指导用药的安全性具有重要意义。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，涉及一种用于制备ELISA鼠单克隆包被抗体和兔多克隆检测抗体的多肽及其应用。

背景技术

药物类过敏反应是一种严重的，可能危及生命的过敏性反应。1920年，Hanzlik和Karsner首次报道将在人或者动物的静脉注射胶状物后引发的类似于过敏症状的现象称为“类过敏反应”。在1947-1949年间，Selye等把首次给大鼠静脉注射卵白蛋白等胶体物质以后，引起的舌头，面部和爪子附近皮肤发绀、浮肿的现象也称为“类过敏反应”。在1986-1988年间，Toman等人发现给动物首次注射油剂的疫苗以后出现瘙痒、水肿、不安和流涎等典型的过敏反应现象，但是这种过敏反应并非由预先存在的IgE介导，而是由于疫苗中含有的吐温-80刺激所引起的。至此，类过敏反应才得以确证。随后，放射性造影剂，脂质体类药物，非甾体类抗炎药，镇痛药和中药注射剂等一系列物质相继被发现会引发类过敏反应。

G蛋白偶联受体(G-protein coupled recepters,GPCRs)是最大的一类七次跨膜受体，可将胞外信号传至胞内产生生物反应，调控细胞增殖，存活和新陈代谢，并在神经信号传递中发挥重要作用。Mas-related gene(MRG)家族是近年来新发现的GPCRs，分别在小鼠，大鼠，人，猕猴和恒河猴中发现约50种MRGs，这些MRGs又可分为几类亚型。在人类体内，有四种MRGPRX(MRGPRX1-X4)亚型，在小鼠体内有MrgprA(A1–A10)，MrgprB(B1–B5,B8)，MrgprC(C11)，MrgprD,MrgprE,MrgprF,MrgprG和MrgprH基因。

MRGPRX2是一类新颖的GPCR，抗菌肽(antimicrobial host defense peptides，HDPs)，神经肽SP，FDA批准的已上市的阳离子药物以及阿片类药物都可激活该受体。MRGPRX2主要在人皮肤MC_TC中有较高的表达，而在肺和内脏的MC_T中几乎没有表达。并且，MC_TC表达MRGPRX2，但不表达MRGPRX3和MRGPRX4。

研究证明MRGPRX2是很多小分子药物引起类过敏、假性过敏的作用靶点。目前针对MRGPRX2的用于实验室研究的抗体和蛋白还存在缺口，更甚于针对MRGPRX2的的临床检测试剂盒和相关靶向性药物处于空白。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种用于制备ELISA鼠单克隆包被抗体和兔多克隆检测抗体的多肽及其应用。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明公开了一种用于制备ELISA鼠单克隆包被抗体和兔多克隆检测抗体的多肽，所述多肽为对类过敏反应特异性受体MRGPRX2蛋白的具有免疫原性的多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

优选地，所述多肽的表位是Mrgprx2蛋白第286-330个氨基酸序列。

本发明还公开了上述的用于制备ELISA鼠单克隆包被抗体和兔多克隆检测抗体的多肽在制备检测Mrgprx2蛋白的抗体中的应用。

本发明还公开了含有上述的多肽的鼠单克隆抗体。

本发明还公开了含有上述的多肽的兔多克隆抗体。