[发明专利]一种分离测定LCZ696异构体杂质的方法

权利要求书

1.一种分离测定LCZ696异构体杂质的方法，其特征在于，具有以下步骤，

1)制备试样溶液

取LCZ696或含有LCZ696的制剂，加稀释剂溶解，得到浓度为0.1-10mg/ml的试样溶液，LCZ696或含有LCZ696的制剂中含有包括如下结构式的异构体杂质(b)、(c)、(d)、(e)，

2)制备对照溶液

取步骤1)得到的试样溶液，加稀释剂稀释50-1000倍，得到对照溶液；

3)采用纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯)反相涂敷型手性色谱柱，设置流动相的流速为0.4-0.8ml/min，所述流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为体积浓度是0.0001-1.0％的磷酸溶液，流动相B为乙腈-甲醇混合液，乙腈、甲醇的体积比为75-85:25-15，100体积份的流动相B中添加有0-1体积份的磷酸，流动相采用梯度洗脱方式进入色谱柱，0分钟，流动相A的体积百分数为65％～75％，流动相B的体积百分数为35％～25％；0分钟至50分钟，流动相A的体积百分数线性减少至55％～45％，流动相B的体积百分数线性增加至45％～55％；50分钟至50.1分钟，流动相A的体积百分数线性增加至65％～75％，流动相B的体积百分数线性减少至35％～25％；50.1分钟至60分钟，流动相A的体积百分数为65％～75％，流动相B的体积百分数为35％～25％；

4)分别向高效液相色谱仪进样等体积的步骤1)试样溶液、步骤2)对照溶液，进样量为5μl-100μl，利用200nm至280nm波长检测，记录色谱图，完成试样溶液中异构体的分离测定。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)、步骤2)所述稀释剂为甲醇和水的混合物，甲醇与水的体积比为75-95：25-5。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，甲醇与水的体积比为80：20。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)流动相A为体积浓度是0.001-0.2％的磷酸溶液。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)流动相采用梯度洗脱方式进入色谱柱，0分钟，流动相A的体积百分数为70％，流动相B的体积百分数为30％；0分钟至50分钟，流动相A的体积百分数线性减少至50％，流动相B的体积百分数线性增加至50％；50分钟至50.1分钟，流动相A的体积百分数线性增加至70％，流动相B的体积百分数线性减少至30％；50.1分钟至60分钟，流动相A的体积百分数为70％，流动相B的体积百分数为30％。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)进样时，进样量为10μl，利用255nm波长检测，色谱柱的柱温为15-40℃。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，色谱柱的柱温为30℃。