[发明专利]一种由基因组被编辑的CHO宿主细胞产生的具有独特糖谱的重组抗体及其制备方法有效
| 申请号： | 201910469740.2 | 申请日： | 2018-08-10 |
| 公开（公告）号： | CN110157694B | 公开（公告）日： | 2020-10-27 |
| 发明（设计）人： | 秦超;周远清;萧翠珍 | 申请（专利权）人： | 百奥泰生物制药股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N9/22;C12N15/55;C12N5/10;C07K16/28;C07K16/30;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京市万慧达律师事务所 11111 | 代理人： | 谢敏楠;张孟迪 |
| 地址： | 510530 广东省广州市广州高新*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基因组 编辑 cho 宿主 细胞 产生 具有 独特 重组 抗体 及其 制备 方法 | ||
1.一对多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.10和SEQ IDNO.11所示。
2.一对多核苷酸，其特征在于，所述的一对多核苷酸分别编码如权利要求1所述的一对多肽。
3.根据权利要求2所述的一对多核苷酸，其序列分别如SEQ ID NO.12和SEQ ID NO.13所示。
4.一对融合蛋白，其特征在于，所述的一对融合蛋白由权利要求1所述的一对多肽分别与天然的或经过人工改造的Fok I的DNA切割域融合而成。
5.根据权利要求4所述的一对融合蛋白，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.14和SEQ IDNO.16所示。
6.一对多核苷酸，其特征在于，分别编码如权利要求5所述的一对融合蛋白。
7.根据权利要求6所述的一对多核苷酸，所述的多核苷酸序列分别如SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.17所示。
8.一种包含权利要求2-3、6-7任一所述的一对多核苷酸载体。
9.根据权利要求8所述的载体，所述的载体为质粒。
10.一种用权利要求8或9所述载体转染的宿主细胞，所述宿主细胞为CHO细胞。
11.根据权利要求10所述的宿主细胞，所述的CHO细胞为CHO-K1。
12.根据权利要求11所述的宿主细胞，所述的CHO-K1适应无血清培养。
13.根据权利要求10所述的宿主细胞，所述的宿主细胞用于表达抗体。
14.根据权利要求10所述的宿主细胞，所述的宿主细胞用于表达具有独特糖谱的抗体。
15.根据权利要求14所述的宿主细胞，所述的独特糖谱与野生型糖谱比较，至少一种糖部分的水平发生变化。
16.根据权利要求15所述的宿主细胞，所述的糖部分选自葡萄糖、岩藻糖、半乳糖、甘露糖、高甘露糖、葡萄糖胺、G0或乙酰葡萄糖胺。
17.根据权利要求15所述的宿主细胞，所述的抗体的糖部分满足以下条件中的一种或多种：
a.所述的抗体岩藻糖的水平降低；
b.所述的抗体甘露糖的水平降低；
c.所述的抗体高甘露糖的水平降低；
d.所述的抗体半乳糖的水平降低；
e.所述的抗体G0含量升高。
18.根据权利要求17所述的宿主细胞，所述的岩藻糖水平小于等于5％。
19.根据权利要求17所述的宿主细胞，所述的岩藻糖水平为0。
20.根据权利要求17所述的宿主细胞，所述的甘露糖含量小于等于5％。
21.根据权利要求17所述的宿主细胞，所述的高甘露糖含量小于等于5％。
22.根据权利要求17所述的宿主细胞，所述的半乳糖的水平小于等于30％。
23.根据权利要求17所述的宿主细胞，所述半乳糖水平小于等于5％。
24.根据权利要求17所述的宿主细胞，所述的G0含量大于等于60％。
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