[发明专利]一种肿瘤细胞三维模型及其构建方法和应用

说明书

本发明属于肿瘤细胞三维培养技术领域，尤其涉及一种肿瘤细胞三维模型及其构建方法和应用。本发明中，在含有肿瘤细胞和成纤维细胞的混合细胞悬浮液中加入海藻酸盐溶液，得到混合细胞‑海藻酸盐溶液，再将混合细胞‑海藻酸盐溶液滴于钙盐溶液中得到混合细胞微球，本发明采用海藻酸盐与钙盐进行交联制备微球作为细胞支架，降低了肿瘤细胞进行三维培养的成本，海藻酸盐有着良好的生物相容性和非免疫原性，能够为细胞提供良好的三维生长环境，并且，本发明将肿瘤细胞与成纤维细胞三维共培养，能够更准确地模拟肿瘤细胞在体内的生存环境，使得构建的肿瘤细胞三维模型应用于抗肿瘤药物的筛选和/或评价更为准确、可靠，能够降低抗肿瘤药物研发的成本。

技术领域

本发明属于肿瘤细胞三维培养技术领域，尤其涉及一种肿瘤细胞三维模型及其构建方法和应用。

背景技术

目前，基于二维细胞培养模型的药物检测仍然是肿瘤研究的主要方法。但是，此方法无法准确地模拟肿瘤细胞复杂的生长环境，因此采用二维细胞培养模型所进行的药物评价是不准确的，构建一个能够更准确模拟人体肿瘤生长环境且经济高效的模型替代二维细胞模型，对于药物开发和评价筛选至关重要。

要提高抗肿瘤药物评价的准确性与可靠性，就要改变传统的体外细胞培养的模型，根据目前的一些研究表明，三维体外细胞培养能够再现生理微环境并与体内的生理反应高度一致。构建肿瘤细胞三维模型需要特殊材料作为细胞支架以支持细胞生长，目前作为细胞支架的材料包括天然细胞外基质材料、合成生物材料、天然纯化分子材料等，这些材料有着良好的生物相容性和物理化学性质，能让细胞在其中保持生长活性。但是，上述作为细胞支架的材料存在成本昂贵的缺陷。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种肿瘤细胞三维模型及其构建方法和应用，用于解决采用现有材料作为细胞支架成本昂贵的问题。

本发明的具体技术方案如下：

一种肿瘤细胞三维模型的构建方法，包括以下步骤：

a)将肿瘤细胞和成纤维细胞配制成混合细胞悬浮液，在所述混合细胞悬浮液中加入海藻酸盐溶液，得到混合细胞-海藻酸盐溶液；

b)将所述混合细胞-海藻酸盐溶液滴于钙盐溶液中，得到混合细胞微球；

c)将所述混合细胞微球置于培养液中培养，得到肿瘤细胞三维模型。

优选的，所述混合细胞悬浮液中所述肿瘤细胞和所述成纤维细胞的数量比例为(2～3)：(1～2)。

优选的，所述肿瘤细胞在所述混合细胞悬浮液中的浓度为1*10⁵个/ml～5*10⁶个/ml；

所述成纤维细胞在所述混合细胞悬浮液中的浓度为1*10⁵个/ml～5*10⁶个/ml。

优选的，所述肿瘤细胞选自前列腺癌细胞、乳腺癌细胞、子宫肌瘤细胞或肝癌细胞。

优选的，所述海藻酸盐为海藻酸钠；

所述钙盐选自氯化钙或硫酸钙。

优选的，所述海藻酸盐溶液的质量体积比浓度为2％～4％；

所述混合细胞悬浮液与所述海藻酸盐溶液的质量比为(1～3)：(1～3)。

优选的，所述钙盐溶液的浓度为0.1～0.2mol/L。

优选的，所述混合细胞微球与所述培养液的体积比为(1～3)：(1～3)。

本发明还提供了上述技术方案所述构建方法得到的肿瘤细胞三维模型。

本发明还提供了上述技术方案所述肿瘤细胞三维模型在抗肿瘤药物筛选和/或评价中的应用。