[发明专利]一种双组分比率型电化学免疫传感器及其制备方法有效

专利信息
申请号: 201910473262.2 申请日: 2019-05-31
公开(公告)号: CN110146699B 公开(公告)日: 2020-09-15
发明(设计)人: 张宏芳;韩秀娟 申请(专利权)人: 西北大学
主分类号: G01N33/559 分类号: G01N33/559;G01N27/48
代理公司: 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 代理人: 马超前
地址: 710127 陕*** 国省代码: 陕西;61
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摘要:
搜索关键词: 一种 组分 比率 电化学 免疫 传感器 及其 制备 方法
【说明书】:

本发明公开了一种双组分比率型电化学免疫传感器及其制备方法,包括传感界面的构建和软核‑硬壳型胶体体,所述传感界面为在基体电极表面修饰N,S共掺杂石墨烯制得;所述软核‑硬壳型胶体体为MB@PbS胶体体和AQ@CdS胶体体;其双组分比率型分析方法为:以醋酸‑醋酸钠缓冲溶液为支持电解质溶液,微分脉冲伏安法扫描所得峰电流进行定量分析,其中MB和Pb的氧化电流之比用于HE4分析,AQ和Cd的氧化电流之比用于CA125分析。本发明所述双组分比率型电化学免疫传感器可用于人附睾蛋白4和糖类抗原125的同时测定。

技术领域

本发明属于电化学分析技术领域,涉及一种双组分比率型电化学免疫传感器及其制备方法,具体为一种基于金属硫化物胶体体标记的双组分比率型电化学传感器。

背景技术

电化学免疫传感分析将抗原-抗体的特异性反应与电化学分析方法的高灵敏度相结合,是复杂样品体系免疫相关物质分析的重要方法。近年来,其在临床诊断、食品分析等领域得到了广泛的应用研究。这些应用领域经常需要检测样品中多种组分的含量。如在环境监控中,经常需要同时监测水体中多种杀虫剂、除草剂等的浓度指标,以综合评价环境污染水平。而在临床诊断中,尽管已经发现的疾病标志物种类众多,但真正进入临床诊断阶段的寥寥无几。医学专家认为,通过联合检测几项肿瘤标志物,对于提高临床肿瘤诊断中诊断的准确性、推广其在临床诊断的应用有很大帮助。例如CA125在卵巢癌临床诊断、治疗反应评价、预后评估及复发监测中的应用已达30余年,被认为是目前卵巢癌生物标志物检测的“金标准”。然而CA125在I期卵巢癌中阳性率很低,还存在组织特异性差等缺点。HE4是一种新发现的卵巢癌标志物,其在卵巢癌诊断中的特异性高于CA125,但其单独使用在卵巢癌筛查诊断中的应用依然存在假阴性等较大的局限性。因此,2011年美国食品药品监督管理局批准了通过CA125和HE4联合检测诊断监测卵巢癌的疾病进展和复发。临床上普遍使用的酶联免疫分析主要基于HRP标记、酶标仪检测,其灵敏度往往受限。而电化学免疫传感器虽然检测灵敏度相对较高,却存在受样品基体影响较大、准确度不高的问题。本专利利用MB@PbS、AQ@CdS两种软核-硬壳结构金属硫化物胶体体,构建了一种同时检测HE4和CA125的双组分比率型电化学免疫传感器。

发明内容

本发明的目的在于解决上述两种疾病标志物高灵敏同时检测的问题,设计并制备一种基于MB@PbS、AQ@CdS两种软核-硬壳结构金属硫化物胶体体标记的双组分比率型电化学免疫传感器,可用于 HE4和CA125的同时测定。

为了实现上述技术目的,本发明具体通过以下技术方案实现:

一种双组分比率型电化学免疫传感器,所述的免疫传感器包括传感界面和电化学标记物,所述的传感界面为在基体电极表面修饰 N,S-rGO制得,所述电化学标记物为金属硫化物胶体体。

所述基体电极为玻碳电极,所述的金属硫化物胶体体包括软核- 硬壳结构的MB@PbS和AQ@CdS胶体体。

所述的软核-硬壳型胶体体通过反相微乳液法将MB和AQ包裹在PbS、CdS胶体体的空腔内所制得。所述两种胶体体表面通过三甲氧基硅烷水解引入氨基。

本发明所述的免疫传感器还包括参比电极、对电极和支持电解质溶液,所述的参比电极为饱和甘汞,所述的对电极为铂丝电极,所述的支持电解质溶液为醋酸-醋酸钠缓冲溶液。

在本发明所述的免疫传感器中,软核-硬壳型胶体体作为信号物质,利用四个电化学信号实现两种抗原的同时准确测定。

在本发明的另一方面,提供了上述双组分比率型电化学免疫传感器的制备方法,将N,S掺杂石墨烯-壳聚糖分散液滴涂在抛光后的基体电极表面,将第目标分析物的第一抗体交联在电极表面得到传感界面,利用夹心型免疫复合物形成在传感界面引入电化学标记物。

所述N,S掺杂石墨烯-壳聚糖分散液的制备方法是将N,S掺杂石墨烯超声分散在壳聚糖的乙酸溶液中。

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