[发明专利]一种适配体电化学传感器

权利要求书

1.一种适配体电化学传感器，包括工作电极、参比电极、对电极，其特征在于所述工作电极为适配体共价结合修饰玻碳电极，参比电极为饱和甘汞电极，对电极为铂丝电极。

2.根据权利要求1所述一种适配体电化学传感器，其特征在于所述适配体共价结合修饰玻碳电极的制备方法是：先在玻碳电极表面修饰4-羧基苯基重氮盐，得到4-羧基苯基重氮盐修饰的玻碳电极；然后取0.1 mol/L EDC和0.1 mol/L NHS混合液20 μL滴定在4-羧基苯基重氮盐修饰的玻碳电极表面，以活化4-羧基苯基重氮盐修饰的玻碳电极表面，反应60min后，用超纯水冲洗2~3次，得到羧基活化修饰电极；将2 μmol/L 的20 μL带氨基的土霉素适配体滴涂在羧基活化修饰电极表面，4℃下孵育12 h后，冲洗后滴加1 mol/L 的20 μL乙醇胺，1 h后用超纯水冲洗2~3次，滴定质量浓度是1%的20 μL BSA，室温下放置1 h，用超纯水冲洗，得到适配体共价修饰电极。

3.根据权利要求2所述一种适配体电化学传感器，其特征在于4-羧基苯基重氮盐修饰的玻碳电极的制备方法：将400 μL的0.1 mol/L NaNO₂溶液加入到20 mL含有2 mmol/L 4-氨基苯甲酸和0.5 mmol/L HCl的溶液中，充分震荡后在室温下反应5分钟，生成4-羧基苯基重氮盐溶液，然后吸取20 μL4-羧基苯基重氮盐溶液滴涂在GCE表面，将修饰电极在真空干燥箱中干燥20 min，得到4-羧基苯基重氮盐修饰的玻碳电极。

4.根据权利要求1所述一种适配体电化学传感器，其特征在于适配体电化学传感器用于土霉素检测。

5.根据权利要求4所述一种适配体电化学传感器，其特征在于土霉素检测方法包括以下步骤：

（1）制作标准曲线：制备好的羧基活化电极放入不同浓度的土霉素标准品溶液中孵育1h，用超纯水冲洗羧基活化电极后置于含5.0 mmol/L [Fe(CN)₆]^3-/4-和0.1 mol/L KCl的水溶液中通过差分脉冲伏安法进行测定，记录下电流响应值，得到土霉素浓度的对数与电流响应值呈线性关系标准曲线；

（2）测定样品土霉素浓度：利用制备好的羧基活化电极放入样品溶液中孵育1h，通过DPV检测电极，记录电流响应值，然后根据步骤（1）获得的标准曲线，即可计算出样品中土霉素的浓度。

6.根据权利要求5所述的一种适配体电化学传感器，其特征在于，土霉素适配体序列为：5'-氨基-C3-GGA ATT CGC TAG CAC GTT GAC GCT GGT GCC CGG TTG TGG TGC GAG TGTTGT GTG GAT CCG AGC TCC ACG TG-3'。